在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是WY存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是Z主要的甲基化位点,它在基因组中呈不均匀分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域,在哺乳动物中mC约占C总量的2-7%。一般说来,DNA的甲基化会YZ基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发SF展都起重要的作用。通过用重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而在实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变,在进行PCR扩展,甲基化的位点可以被当作一个个C/T的SNP来处理,用直接测序法来判断CpG位点是否发生甲基化,进而为临床诊断检验提供依据。
【服务流程】
1. 待检样品基因组DNA的提取及DNA的纯度检测。
2. 修饰基因组DNA:在双链DNA变性解链后HSO3-作用下,C若已有甲基化则无此改变;若DNA CpG岛若无甲 基化,则序列 中的改变为C→U,CG→UG。
3. 利用引物特异性的PCR对修饰后的纯化的DNA进行扩增。
4. 产物测序后与未经处理的序列比较分析。
【客户提供】
♦ 基因组区域信息和新鲜的组织样本材料
【提供结果】
♦ 完整实验报告及特异性位点的DNA甲基化的检测结果。
【质量保证】
♦ 优化的引物设计方案和样品处理操作,可提供更高的PCR成功率。