羊驼纳米抗体制备

 钟鼎生物的技术总监是国内首批研究单域抗体的科学家之一，拥有十余年纳米抗体制备经验。随着抗体药物研究方兴未艾，研究机构和医药企业需求日益增多。应客户之急迫需求，我们在南京建立了羊驼饲养繁育基地，拥有健康适龄、免疫背景清晰、父系种源可查的羊驼20余只，配备专业的兽医和饲养设施。

* 南京羊驼饲养基地，客户可亲临养殖基地取样，监督免疫，实时查看实验动物状态。

* 针对不同客户的预算需求，我们可以提供多种服务模式，可提供空白羊驼进行免疫，亦可使用重复免疫的动物（不同抗原免疫小于3种）

* 灵活的交付模式： 可提供血清或动物（客户可亲临养殖基地取样，监督免疫）

* 客户自行购买羊驼，委托我公司代为饲养或免疫。
 

钟鼎生物拥有成熟的蛋白表达平台，依据项目要求，可选原核表达系统，哺乳动物表达系统，杆状病毒-昆虫细胞系统，配合AKATA纯化设备可以制备纯度大于95%，浓度大于2mg/ml的蛋白免疫原，保证满足免疫需求。

羊驼免疫周期表
动物要求 雌性健康羊驼一只 15-20月龄 体重50kg左右 抗原要求 纯度大于95% 浓度2mg/ml X 2ml 如具致病性请提前告知 不含叠氮钠	0-2天	免疫原检测，免疫前采血，预留阴性血清
	3天	完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫
	25天	不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫
	32天	采集外周血，ELISA检测抗血清效价
	46天	不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫
	52天	采集外周血，ELISA检测抗血清效价
	65天	不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫
	72天	采集50mL 外周血，用于纳米抗体库构建

* 不是所有的抗原都能使动物产生免疫应答，根据我们的经验，如果经过3~4次免疫后检测血清效价（OD450≈1.0）小于5000，我们建议客户终止项目。

 

抗原的要求
A：抗原纯度
高纯度的抗原在产生免疫应答与筛选过程至关重要，因此建议客户抗原纯度在95%以上。我们在收到客户抗原后，会通过SDS-PAGE检测抗原纯度。
B：抗原量及安全性
根据不同抗原，需要客户提供不同量的抗原，请提前与技术人员沟通。同时客户不得隐瞒抗原是否具有致病、致死危险，如有隐瞒且造成实验动物死亡客户需要额外支付动物和项目成本费。
C．抗原浓度
抗原浓度保证在2mg/mL，且不含叠氮钠。建议使用干冰运输至我公司。

纳米抗体相关服务

构建噬菌体抗体库 周期：3-4周 第四次免疫结束后，从静脉抽取50mL全血，用于分离外周血淋巴细胞； 抗体库质量：1）插入率﹥95%，随机挑取48个克隆测序，没有重复序列 2）抗体库容量达到107~108次方 向客户提供质检报告与抗体库	抗体库筛选 周期：3周 根据项目实际情况，选择不同的筛选方案，如竞争筛选，固相筛选，液相筛选，负筛选等筛选方法。 免疫抗体库，每轮筛选后挑取24个克隆进行鉴定； 向客户提供5个以上的特异性克隆；
纳米抗体表达纯化 周期：2 周 将纳米抗体基因克隆至真核或原核表达载体；向客户提供高纯度纳米抗体；	亲和力测定 周期：1周 采用biocore 测定抗体的亲和力

查看详细链接：http://www.zoonbio.com/antibody/monoclonal-nanobody.html