小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】

产品说明
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】
肾小管的生理功能有三方面，物质的重吸收和排泌功能,如钠、钾、氯、钙等电解质,蛋白质、氨基酸、葡萄糖的吸收和排泌;尿液的浓缩稀释;泌氢和尿液酸化。其中，小鼠肾小管平滑肌细胞呈长梭形，无横纹，细胞核一个，呈长椭圆形或杆状。小鼠肾小管平滑肌细胞传3-5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾小管平滑肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾小管平滑肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肾小管平滑肌组织片能使得肾小管平滑肌细胞的一些功能特性发生改变，从而将肾小管平滑肌细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养小鼠肾小管平滑肌细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的肾小管平滑肌原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肾小管平滑肌培养试剂盒适合于培养小鼠的肾小管平滑肌细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠肾小管平滑肌细胞组织解离液 (3×1ml) （2）小鼠肾小管平滑肌细胞组织处理缓冲液(100ml) （3）FibrOutTM小鼠肾小管平滑肌成纤维YZ剂(1ml（500x）) （4）小鼠肾小管平滑肌组织洗液(5 x 100 ml) （5）小鼠肾小管平滑肌细胞生长因子（1ml500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠肾小管平滑肌细胞基础培养基(5 x 100ml) （7）小鼠肾小管平滑肌组织预备液 (1 x 100 ml) （8）小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】
产品信息：
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。  
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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试剂及耗材  
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