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北京现货Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)优惠价

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京现货Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)优惠价是高品质的二抗产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)等二抗产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:北京现货Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)优惠价
    编号:SY0721
    品Pai:百奥莱博
    规格:100μl
    本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白,但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。

    Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC,Amax(激发波长)为493nm,Emax(发射波长)为519nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。

    浓度:0.75 mg/ml
    缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
    稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
    防腐剂:0.025% 叠氮化*
    推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
    储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。

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    ·4×Tris-HCl分离胶缓冲液,pH8.8
    编号:SY0355
    英文名称:4×Tris-HCl Separating Gel Buffer, pH8.8
    规格:250ml
    4×Tris-HCl分离胶缓冲液中含有1.5M Tris base,用HCl调节pH8.8,25 ℃。可用于SDS-PAGE或native PAGE下层胶的配制,本产品不含SDS,如配制SDS-PAGE,需另外添加10%SDS(SY0352),或购买4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液(SY0354)。

    Tris英文名称:Tris base;2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
    分子式:C4H11NO3
    分子量:121.14。
    储存条件:室温。

    ·双链DNA定量检测试剂盒
    编号:SY0260
    英文名称:Picogreen dsDNA Assay Kit
    规格:2000T
    Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

    常用的检测核酸的方法有:1)紫外吸光法(A260),该法操作简便,但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大,还容易受到核酸样品中污染物的干扰,不能区分DNA和RNA,而且灵敏度低(ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA);2)探针杂交法,该法是传统检测微量DNA的常用方法,基本能满足目前疫苗和ZL性生物制品的检测需求,但是该法耗时较长,操作繁琐,稳定性、敏感性和特异性较差;3)Hoechst33258染料法,Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料,基本不受蛋白质等污染物的干扰,可以检测低至10ng/ml的DNA;在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

    Picogreen dsDNA定量法:Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

    相比传统的方法,Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势:
    ①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,可节省宝贵的样品;
    ②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
    ③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
    ④易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96和384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
    ⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

    若每次分析体积为2 mL,本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用,若使用微孔板或96孔板检测,每次使用量200µl,则各组分试剂足够2000次分析。

    产品组份:

     
    组分名称 产品编号/规格 保存
    dsDNA Quantitation Reagent 100µl×10 2~6℃避光干燥
    2×TE buffer 50ml 2~6℃(短期)或-20℃(长期)
    Calf thymus DNA standard (100µg/ml) 1ml 2~6℃(短期)或-20℃(长期)


    注意事项

    1)Picogreen定量试剂含有DMSO(已知有毒试剂),请小心操作;
    2)尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性,但是该试剂能结合双链DNA,请操作时务必小心。

    试剂准备
    1)1×TE buffer 的配制:将2×TE 用无菌去离子水(不含Dnase)等体积稀释至1×工作液。
    2)PicoGreen工作液的配制:使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温;PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的(共10管)。实验当天,根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品,可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
    【注】:
    a、由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。
    b、PicoGreen 试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
    c、溶液Z好在配制好数小时内使用,以保证结果。

    检测步骤
    1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制
    用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释,即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。
    2、 标准曲线的制备
    ① 比色皿体系检测---(2ml)
    a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入1ml PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。
    【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
     
    TE (µl) 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) Calf thymus DNA standard终浓度
    0 1000 1000 1µg/ml
    900 100 1000 100ng/ml
    990 10 1000 10ng/ml
    999 1 1000 1ng/ml
    1000 0 1000 blank


    表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

    b、于荧光仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
    【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。
    c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值,对DNA浓度和荧光值做标准曲线。
    ② 微孔板体系检测(200µl)
    a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入100µl PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
     
    TE (µl) 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) Calf thymus DNA standard终浓度
    0 100 100 1µg/ml
    90 10 100 100ng/ml
    99 1 100 10ng/ml
    99.9 0.1 100 1ng/ml
    100 0 100 blank


    表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

    b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
    【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。


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    ·AP-1-GFP报告基因质粒
    编号:SY0187
    英文名称:AP-1 GFP Reporter Plasmid
    规格:1μg
    AP-1-GFP报告基因是用于检测AP-1转录活性水平为目的的报告基因。AP-1(activating protein-1)是一类核转录因子参与转化、分化、凋亡等多种生物学功能。

    AP-1-GFP报告基因主要应用于细胞中MAPK/JNK信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

    pGMAP-1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AP-1结合位点,可以GX地检测AP-1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AP-1-GFP报告基因更易于转染。

    质粒图谱



    pGM AP-1 -GFP质粒测序引物
    5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

    使用说明
    pGMAP-1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

    注意事项
    1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
    2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

    储存条件:-20℃。


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    ·谷胱甘肽高速纯化树脂(用于GST标签蛋白纯化)
    编号:SY0396
    英文名称:Glutathione Agarose Resin 4FF
    规格:10ml
    本品是一种GST标签蛋白纯化树脂,结构上是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

    此外,本品特异性好,性价比高,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

    基质(Matrix):高度交联的4%琼脂糖微球
    配体(Ligand):通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
    孔径(Bead size):45-165µm
    载量(Capacity):>10mg GST protein/ml 基质(40kDa)
    压力(PressureMax):0.3 MPa, 3bar
    pH稳定范围:3-12
    储存缓冲液:20%乙醇
    储存条件:4℃,有效期2年

    ·XL10-Gold化学感受态细胞
    编号:SY0018
    英文名称:XL10-Gold Chemically Competent Cell
    规格:100μl×10管
    XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的GX转化。具有四环素和*霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,

    本品基因型:TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。

    主要具有如下特点:
    ① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的GX转化;
    ② 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
    ③ 更适于质粒文库的构建;
    ④ 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。

    注意事项

    1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
    2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
    3)为确保转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl。
    4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,化实验可能遇到的风险。

    使用方法

    1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
    2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA或2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
    3)置于42℃水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。
    4)向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养1h(225-250rpm),目的是促使菌体复苏。
    【注】:此步也可用LB培养基(不含抗生素)进行菌体复苏。
    5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
    【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。

    储存条件:-80℃



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