3D细胞培养和模型构建

3D细胞培养和模型构建
在细胞培养和组织工程领域，三维（3D）细胞培养技术已经被广泛应用于学术研究和制药研发。处于3D环境中的体内细胞往往具有特征性的生理和生物力学信号，从而影响诸多细胞功能，比如细胞迁移、粘附、增殖和基因表达等。体外3D培养系统，因其能模拟体内生长环境，更贴近体内真实微环境，从而能够使细胞表现出更接近生理的表型、相互作用及反应，可以更精确的重现细胞行为。总体上，3D细胞培养系统可用于帮助体内不同程度的细胞复杂性和功能的实现，具体由细胞类型和培养环境决定。
 
麒盟生物目前提供的3D细胞培养服务主要包括以下几个方面：

1.      水凝胶（或其他细胞外基质）3D细胞培养
2.      悬滴、超低吸附或磁悬浮法无支架3D细胞培养
3.      肿瘤细胞3D微球体模型构建与检测
4.      干细胞3D细胞培养模型构建与检测
5.      3D培养细胞模型的药物筛选与毒性检测
6.      3D条件下细胞共培养的研究

 
3D细胞培养（模型构建）服务实验流程：

1.      实验前客户需要确定的内容

1）    细胞类型：肿瘤细胞、干细胞、其他细胞系或者原代细胞等
2）    所需进行的3D细胞培养模型：支架培养体系（水凝胶或者其他细胞外基质等）或者无支架培养体系（悬滴、超低吸附或磁悬浮等）
3）    进行3D培养后续检测内容：细胞活性检测、免疫荧光检测、靶分子表达检测或者进行药物筛选等。
 

1.      麒盟生物与客户沟通确定实验方案

1） 已有文献报道的3D培养模型：根据客户的要求，对文献报道的方法进行适当的调整和优化，确定完整的实验方案。
2） 尚无文献报道的模型构建服务：根据客户的要求，按相似的文献报道和麒盟生物的经验，初步确定1-2个模型构建方案。
 

1.      实验实施

1） 实验材料的购买：不同的模型所需的实验材料差异较大，根据方案确定。
2） 细胞进行传统2D培养。
3） 3D培养模型构建的实施：麒盟生物会在实验进行过程中，根据实验的实际情况，在与客户确定后进行调整。
4） 成功构建模型的鉴定：在完成3D细胞培养之后，根据实验方案进行鉴定，经与客户确认后，提供完成的实验结果以及模型构建方法。
 

1.      后续检测服务

常规的2D培养细胞检测，包括细胞增殖和毒性检测、靶分子表达量检测（荧光定量PCR和Western blot）、靶分子细胞内定位（免疫荧光）和细胞转染等都可在3D培养模型下进行。其他特殊的3D培养条件下的检测，包括切片染色、电镜观察、低氧检测以及外泌体研究等，麒盟生物也能提供方案进行分析。欢迎广大新老客户咨询。
 

图1. 胶原蛋白进行3D细胞培养示意图
 
 
图2. 细胞与胞外基质电镜示意图
 

图3. 3D培养条件下的细胞荧光染色示意图