Entranster-H---（HEK293T、Hela、CHO细胞转染特别推荐）

一 产品介绍

英格恩生物公司（Engreen Biosystem Co,Ltd.）是专业的转染试剂研发生产厂商。EntransterTM是英格恩生物公司研发合成的纳米聚合物转染试剂，该试剂采用纳米技术合成，是一代转染试剂。由于纳米技术的应用，EntransterTM-H在HEK293T细胞中转染效率的可以达到95％以上，同时有很低的细胞毒性。

本品适合在HEK293T细胞中进行GX快速转染或进行大量转染的实验。

二 重要提示

1.本品在转染过程中可以添加抗生素，抗生素的添加与否不影响转染效率和毒性。

2.如转染后需要用Trizol提取RNA，建议转染后6小时换液。

三 实验过程（以6孔板为例）

1.提前一天细胞铺板

提前一天将细胞种植在6孔板，以转染时细胞密度在50％左右为宜。

2.转染过程

⑴将5μg的DNA用50μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。

注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM或无血清DMEM。

⑵将5μl的EntransterTM-H用50μl无血清稀释液体稀释，充分混匀，制成EntransterTM-H稀释液。室温静置5分钟。

⑶将EntransterTM-H稀释液分别加入到DNA稀释液中，充分混匀（可用振荡器振荡或用加样器吹吸10次以上），室温静置15-30分钟。转染复合物制备完成。

注意：静置时间30分钟较15分钟，转染效率更高。

⑷将转染复合物加入到含细胞和完全培养基的培养容器上，轻柔混匀。

注意：①对本试剂，采用含血清的全培养基有助于提升转染效率。②完全培养基可加抗生素。

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⑸培养4-6小时后更换培养基，继续培养24-48小时。

注意：①如细胞没有毒性等不良情况，转染后4-6小时可不必更换培养基。