碟式激光共聚焦显微镜

共聚焦显微技术的本质在于去除非焦面上的杂散光,获取Z轴方向的高分辨率图像。


盘片包括多组呈螺旋形分布的高密度针孔(总数约2万个)安装在物镜的像平面上.激发光通过真空和物镜聚焦到样本的离散的点上,盘片高速旋转,每秒钟可以照射标本几百次(相当于电光源按光栅格式高速扫描样本),实现扫描区域内由无数个点组成的场照明,使样本同时被激发.发射光通过物镜和盘片上, 针孔与激发光照射点共轭,绿除非焦面上的杂散光, 投射到目镜或CCD上,有效地生成实时焦平面图像(相当于数千个传统 Confocal的针孔在同时工作),通过高分辨率-高灵敏度Cooled CCD采集图像。


　 碟式Confocal的明显优势是可以检测到活细胞的瞬间变化,而图像质量达到传统Confocal的分辨率. 随着CCD技术的发展,科学级CCD的量子效率(QE)更明显优于光电倍增管(PMT),因而可降低激发光强度，避免或减少 荧光漂白,延长试验时间,保持细胞活性。