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【优尔生USCN】白三烯B4(LTB4)检测试剂盒 CEA562Ge

产品信息
  • 特异性

    本试剂盒用于检测白三烯B4 (LTB4),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
    由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

    回收率

    分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的白三烯B4 (LTB4)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

    样本 回收率范围(%) 平均回收率(%)
    serum(n=5) 88-95 92
    EDTA plasma(n=5) 94-101 97
    heparin plasma(n=5) 86-99 91
    精密度

    精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100 
    批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
    批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
    批内差: CV<10% 
    批间差: CV<12% 

    线性

    在定值血清及血浆样本内加入适量的白三烯B4 (LTB4),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中白三烯B4 (LTB4)含量的测定值与理论值的比率。

    样本 1:2 1:4 1:8 1:16
    serum(n=5) 83-98% 78-105% 92-101% 78-88%
    EDTA plasma(n=5) 93-101% 78-88% 80-97% 91-104%
    heparin plasma(n=5) 92-99% 78-90% 91-101% 91-104%
    稳定性

    经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
    为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

    试剂盒内容
    试剂名称 数量 试剂名称 数量
    96孔板(预包被) 1 96孔板覆膜 4
    标准品 2 标准品稀释液 1×20mL
    检测溶液A 1×120µL 检测稀释液A 1×12mL
    检测溶液B 1×120µL 检测稀释液B 1×12mL
    TMB底物 1×9mL 终止液 1×6mL
    浓洗涤液 (30 × concentrate) 1×20mL 说明书 1
    实验流程

    1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
    2. 加样(标准品及样本)50µL,
        加入50µL检测液A(临用前配制);
        37°C温育1小时。
    3. 洗板3次;
    4. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
    5. 洗板5次;
    6. 加TMB底物90µL,37°C孵育15-25分钟;
    7. 加终止液50µL,立即450nm读数。

    实验原理

    本试剂盒应用竞争YZ酶联免疫分析法测定标本中待测物质水平。将白三烯B4 (LTB4)单克隆抗体包被微孔板,制成固相载 体,往包被抗体的微孔中同时加入生物素标记的抗原和待测抗原(标准品或样本),待测抗原与生物素标记抗原对特异性抗体进行竞争结合。温育后经洗涤去掉未结合物,然后加入HRP标记的亲和素,经过温育和彻底洗涤后加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。待测标本浓度越高,标记抗原和抗体的结合就越受到YZ,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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