SILAC技术服务

一、SILAC(定量蛋白质组学)原理：
       SILAC ( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技术是利用哺乳动物细胞增殖对必需氨基酸（Lys，Arg等）的依赖性原理而设计的代谢标记蛋白质的方法。以Lys为例，普通的Lys分子中有6个12C原子，用13C替代普通Lys中的全部12C原子，从而生成13C标记的Lys。13C标记的Lys要比普通的Lys多6Da。
       比如两组细胞，一组用含普通Lys的培养基培养（记为K0），一组用含13C的Lys培养（记为K6）。由于Lys是细胞增殖的必需氨基酸，在细胞培养过程中13C标记的Lys自然“掺入”到新和成的蛋白质中，导致整个细胞的蛋白质组被13C标记的Lys所标记。鉴于K0和K6两个氨基酸存在6Da的质量差异，所以在后续LC-MS/MS对蛋白质进行分析时，能同时完成样品中蛋白质的鉴定和定量（6Da的质量差异）。根据定量结果，能直接判断蛋白质表达水平差异、区分特异性和非特异性相互作用等。
二、SILAC(定量蛋白质组学)实验流程：

                                               
二、SILAC(定量蛋白质组学)特色：

• 一次分析定量比较2-3个样本的蛋白组，分析早期将各样品混合，平行性。监测动物蛋白数达4000-8000。
• 定量分析时线性范围广，善于定量差异大的蛋白。