伊维菌素检测试剂盒

1、适用范围

可定性定量检测原奶、纯牛奶和奶粉等样品中的伊维菌素。

2、产品参数

产品交叉反应：

产品主要参数：

3、试剂盒保存

试剂盒保存于2-8℃，有效期12个月。

4、样本前处理

原奶和纯牛奶

称取牛奶1±0.01g，于7mL离心管中；

加入1mL1×提取缓冲液，涡旋混匀30s；

加入2mLyijing，涡旋混匀1min；

2500rpm，离心5min；

取上清液0.5mL，40℃氮气下吹干；

0.25mL样本复溶液涡旋30s；

2500rpm，离心1min；取上清200μL用于点样。

样本稀释倍数：2倍

奶粉

称取奶粉2±0.01g，于50mL离心管中，加入去离子水20mL，震荡至奶粉充分溶解；

取上述还原乳1±0.01g，于7mL离心管中；

其余步骤按照“原奶和纯牛奶”方法进行。

样本稀释倍数：20倍

5、检测步骤（在25±3℃条件下操作）

使用前将试剂和微孔板回温至室温，用后放回2-8℃。

5.1 准备

取出需要数量的微孔板，其余的放入自封袋中，保存于2-8℃。建议每个样品和标准液做2个平行试验。

5.2 加样

加酶结合物50μL到每一微孔中、然后加入标准品/样品70μL到相应微孔，接着加入30μL伊维菌素抗体，轻轻震荡混匀后，盖上盖板膜

5.3 孵育

室温25℃避光反应30min

5.4 洗板

小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加1×洗涤液250μL/孔，重复洗涤5次，每次间隔10s，用吸水纸拍干。

5.5 显色

每孔依次加入底物液A50μL，底物液B50μL，轻轻震荡混匀后，盖上盖板膜，25℃室温下避光反应15min。

5.6 终止和读值

加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630 nm检测，请在5min内读完数据），

测定每孔OD值。（若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定）。

6、结果分析

标准品和样品的平均OD值除以零标准的平均OD值，再乘以100。零标准为（吸光度值），其他OD值为吸光度的百分数。