营养琼脂（普通斜面培养基）

　　广东环凯微生物科技有限公司是广东省微生物研究所属下的高新技术企业(广东省微生物研究所隶属于广东省科学院)，自1993年成立以来，一直致力于生物安全监测与控制产品的研发、生产和经营。公司是国内食品安全检测和控制高技术产品的重要研发和生产基地，是业内领先的技术创新ZX，近年来通过承担国家和省部级食品安全科技项目，取得国家和广东省科学技术奖励七项，获得国家专利二十七项。公司拥有一支高学历、年轻富有激情的微生物研发、生产及营销团队，团队中博士生导师、具高级和中级职称的技术人员近40人，博士及硕士研究生近30人，大专以上学历职工占总人数的80%。公司新落成的研发和生产基地位于广州科学城中科院广州分院、广东省科学院生物高新技术产业化示范基地，基地拥有多条先进生产线：其中微生物检测产品厂拥有国内领先水平的微生物检测产品GMP生产车间，消毒剂厂拥有多条高标准、现代化食品工业用、医用GX环保洗涤消毒剂生产线等等。 公司规模化生产微生物检测产品;水质快速检测系列产品;GX环保洗涤消毒剂生产以及生物安全实验室装备等四大系列近600个品种的产品，广泛应用于国内各省市、港澳台地区以及东南亚国家。

　　营养琼脂产品用 途：

　　用于绿脓杆菌生长试验。(GB)

　　原 理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

　　营养琼脂配方(每升)：蛋白胨10g

　　牛肉膏粉3g

　　氯化钠 5g

　　琼脂15g

　　pH 7.3±0.2

　　营养琼脂使用方法：

　　称取本品33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

　　(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100，1：1000……稀释液。

　　根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

　　稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

　　观察结果。

　　菌落计数方法：

　　做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

　　菌落计数的报告：

　　选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计

　　A：稀释度的选择：

　　应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之(见附表)。

　　若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字(见表中例2及3)。

　　若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。

　　若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。

　　若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以稀释倍数报告之(见表中例6)。

　　若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以Z接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。

　　菌落数的报告：

　　菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位数字后面的有效数值，以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数，也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。

　　稀释度选择及菌落数报告方式

例次	稀释液及菌落数			两稀释液之比	菌落总数个/g或mL	报告方式个/g或mL
	10-1	10-2	10-3
1	多不可计	164	20	——	16 400	16 000或1.6×104
2	多不可计	295	46	1.6	37 750	3 8000或3.8×104
3	多不可计	271	602.2	——	27 100	27 000或2.7×104
4	多不可计	多不可计	313	——	31 300	31 0000或3.1×105
5	27	11	5	——	270	270或2.7×102
6	0	0	0	——	＜1×10	＜10
7	多不可计	305	12	——	30 500	31 000或3.1×104

 
质量控制：
           本品接种下列菌株，置于36±1℃温箱中培养48±2h，结果如下：

菌    名	菌    号	生长状况	菌落特征
大肠埃希氏菌	ATCC25922	良好	白色—灰白色，圆形，边缘整齐，表面光滑，湿润。
金黄色葡萄球菌	ATCC6538	良好	黄色，圆形，边缘整齐，表面光滑、湿润，不透明。

 
贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
 
规    格： 250g