大肠杆菌O157：H7显色培养基

大肠杆菌O157：H7显色培养基

HiCrome MacConkey Sorbitol Agar Base　

原理　 　 　 　 　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

麦康凯山梨醇琼脂培养基 是根据Rappaport和Henigh的文献描述而制备的（1）。培养基中含有山梨醇和BC指示剂，不含乳糖。用于鉴别大肠杆菌O157:H7肠道病原菌。

大多数大肠菌群菌株 会发酵山梨醇，产生酸。当pH值低于6.8时，培养基中的中性红会变成粉红色。同时普通大肠杆菌具有ß-D葡萄糖醛酸酶，当遇到培养基中BC指示剂时，会呈现蓝绿色。当两种颜色叠加时，普通大肠杆菌在此种培养基中，会呈现蓝紫色。

大肠杆菌O157:H7不发酵山梨醇（2），也不具备ß-D葡萄糖醛酸酶活性（3），因而在此种培养基中产生的菌落为无色。

March和Ratnam报告（2），山梨醇麦康凯琼脂培养基对大肠杆菌O157:H7的检测具有的敏感性和85%的特异性，该培养基可作为筛选大肠杆菌O157:H7的可靠手段。

此培养基中：碳源、氮源及其它必要的生长营养素，由酪蛋白酶解产物和䏡蛋白胨提供；结晶紫和胆盐会YZ大多数革兰氏阳性菌生长；培养基中的氯化钠维持渗透压平衡。

如果需要，此培养基还可添加 碲酸盐头孢克肟添加剂（FD147），可使培养基更具有选择性（4）。亚碲酸钾可使大肠杆菌O157选择性生长，并YZ嗜水气单胞菌和普罗维登菌的生长；头孢克肟可YZ变形杆菌。

注：假单胞菌在此培养基中也可产生无色菌落。若需对可疑菌落辨别，可进行氧化酶试验，在5-10秒内观察结果。

应用　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

HiCrome™麦康凯山梨醇琼脂培养基 推荐用于从食物和动物饲料中选择性分离大肠杆菌O157:H7。

培养基成分　　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

成分                               克/升

酪蛋白酶水解物                     17

䏡蛋白胨                           3

山梨醇                             10

胆盐混合物                         1.5

氯化钠                             5

结晶紫                             0.01

中性红                             0.03

BC指示剂 ,                         01

琼脂                               13.5

pH（25℃）                    7.1±0.2

配置　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

在495ml蒸馏水中溶解25.06克,加热至沸腾以完全溶解。15磅灭菌（121°C）15分钟。冷却到45°C。混匀，倒入无菌培养皿。

如果需要添加液态碲酸盐头孢克肟添加剂（FD147），在无菌培养基冷却前添加。

质量控制　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

● 外观——浅黄色至粉红色，单一自由流动粉末

● 成胶性——牢固，可与1.35%琼脂凝胶相媲美

● 制备好的培养基的颜色和透明度——在培养皿中为紫红色、澄清并稍不 透明的凝胶形式

● 配比浓度——5.01%w／v(5.01g/100ml水)水溶液在25°C下pH为7.1±0.2

● pH值——6.90-7.30

培养结果　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

5-37°C孵育18-24小时后观察培养特征（如有必要，可延至48小时）。

参考文献 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

1.Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1177.

2.Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, (1985), J. Infect. Dis., 151-775.

3.Thompson et al. (1990). J. Clin. Microbiol. 29, 2165-2168.

4.Zadik P.M., Chapman P.A. and Siddons C.A., (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158.

     产品引用文献

1. Sreepriya Prakasan, Parmanand Prabhakar, Manjusha Lekshmi, Sanath Kumar,Binaya Bhusan Nayak.Isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli harboring variant Shiga toxin genes from seafood.Vet World. 2018 Mar; 11(3): 379–385.

2. SK Manna, C Manna,et al.Serogroup distribution and virulence characteristics of sorbitol-negative Escherichia coli from food and cattle stool.Journal of Applied Microbiology, 2010, 108 (2) :658–665

3. KM Mbae，MK Ndwiga，FG Kiruki.Microbiological Quality of Kachumbari , a Raw Vegetable Salad Popularly Served Alongside Roast Meat in Kenya.Journal of Food Quality,2018,(35):1-7