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HPS6试剂盒

产品信息
  • HPS6试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中赫曼斯基普德拉克综合征蛋白6(HPS6)含量或活性。
    名称:人赫曼斯基普德拉克综合征蛋白6(HPS6)ELISA试剂盒
    种属:人
    英文名:Human Hermansky Pudlak Syndrome Protein 6 (HPS6) ELISA Kit
    规格:48T盒/96T盒
    关键词:赫曼斯基普德拉克综合征蛋白6, HPS6, 检测试剂盒
    保存温度:2~8℃
    有效期:6个月
    产地:国产(默认)|进口(需核实有无)
    HPS6试剂盒阴性对照出现阳性结果,可能原因和解决方法:
    问题一:阴性对照出现阳性结果
    可能原因 解决方案
    试剂/样本污染 试剂和样品可能污染,或者由于孔之间的溅洒出现交叉污染应当更换新鲜试剂,小心操作移液器。
    夹心ELISA-检测抗体与包被抗体/抗原反应 确定使用的是正确的包被抗体和检测抗体,他们之间不会互相反应。
    酶标板洗板不彻底 用洗液充满板孔确保每孔被充分洗涤,洗板前确保所有的剩余抗体溶液被倒净。
    抗体量过多导致非特异结合 根据推荐用量使用抗体,尽量使用较少的抗体
    HPS6试剂盒酶标板整体背景高,可能原因和解决方法:
    问题二:酶标板整体背景高
    可能原因 解决方案
    结合反应太强或时间过长 检查底物的稀释,使用建议的稀释度,当酶标板显色足够进行吸光度读数时立即使用终止液终止反应
    底物溶液或终止液不是新鲜配制的 使用新鲜配制的底物溶液,终止液应该是清亮透明的,如果变黄或其他颜色则是被污染的标志,需要重新配制
    没有终止反应 如果底物反应没有被终止,颜色会继续变化
    酶标板在酶标仪度板前放置时间过长 颜色会继续变化,尽管加了终止液,依然会以很慢的速度变化
    实验器皿污染 确保试剂是新鲜配制的并且使用的是清洁的玻璃器皿
    底物孵育过程没有避光 底物孵育应该在避光环境下进行
    孵育温度过高 抗体在适宜的温度下有的结合活性,确保孵育在正确的温度下进行,孵育箱要设定好温度并正常工作,孵育温度可能需要一些优化
    抗体非特异性结合 应确保进行了封闭并且使用的是恰当的封闭液,Z好使用5%~10%的与二抗同种动物来源的血清或牛血清,确保板孔经过预处理以防止非特异结合,使用亲和力强、纯度高的抗体,Z好经过了预吸收处理
    HPS6试剂盒吸光度数值低,可能原因和解决方法
    问题三:吸光度数值低
    可能原因 解决方案
    使用的样品中没有显示靶蛋白或者靶蛋白显示的水平低 检查靶蛋白表达系统,确保它在您的样品中被表达出来,如果靶蛋白的表达水平低,需要增加样品使用量,或者您可能需要选择一个更加灵敏的检测方法,确保您使用的是没有超过测定方法检测范围的阳性对照
     
    抗体不足 确定使用的是建议的抗体量,为了使结果更好可能需要增加抗体的浓度
    底物溶液不是新鲜配制或成分有误 使用新鲜配制底物溶液,确保储备液在有效期内并且正确保存,使用的浓度也是正确的,确保试剂的按正确的浓度使用
    试剂不是新鲜配制或PH值有误 确保试剂配制正确并在有效期内
    孵育时间不够长 如果建议了孵育时间,确保按推荐的时间长度孵育抗体,为了使结果更理想,孵育时间可能需要增加
    孵育温度太低 抗体在适宜的温度下有的结合活性,确保孵育时在正确的温度下进行,孵育箱要设定好适宜的温度并正常工作,孵育温度可能需要一些优化,确保所有的试剂在使用前是室温
    未加终止液 加入终止液可以增加显色反应的强度,也能固定反应的颜色
    HPS6试剂盒吸光值高,可能原因和解决方法
    问题四:吸光值高
    可能原因 解决方案
    样品和/或阳性对照吸光度数高。吸光度没有按样品在板上的稀释梯度递减 样品或阳性对照的浓度过高,超出了实验方法检测的范围。重新设置实验方法或者在加样前稀释降低样品和对照的浓度,在处理结果计算浓度时考虑到所作的稀释
    HPS6试剂盒酶标板上吸光度不规律,可能原因和解决方法
    问题五:酶标板上吸光度不规律
    可能原因 解决方案
    孵育时酶标板叠在一起 酶标板叠在一起使板子每个孔的温度不能平衡一致,请避免堆积
    吸液不一致 确保移液器使用正确并进过校准、确保枪头差的足够紧密。板子稀释时要特别仔细,注意确保每个枪头都吸上和排除正确量的液体,这对平行样品结果的一致性有很大影响
    抗体稀释液/试剂 为保证板子所有孔的浓度一致,确保所有的试剂和样品在加到板子上以前都被均匀混合
    孔板变干涸 确保所有孵育期间酶标板始终被盖好。放置一个潮湿的水盘(确保清洁,无菌水)在孵育箱底部
    洗板不充分 这将导致一些孔没有其他孔清洁的好,残留不同量的未结合的抗体,使后面的结果产生不一致
    酶标板底部不净影响吸光度读取 读板前小心清洁酶标板底部
     
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