转录YZ解决方案

CRISPR/Cas9系统是一种由RNA引导Cas9蛋白对靶基因进行修饰的技术。将Cas9中两个核酸酶结构域突变，就会使Cas9蛋白失去对DNA的切割活性，但不影响其与DNA的结合能力，这种失去DNA切割活性的Cas9蛋白被命名为Dead Cas9（dCas9）。利用gRNA介导dCas9能够精确识别靶基因的特点，将在gRNA引导下的dCas9蛋白结合到启动子区或转录因子结合区，则可阻止 PolII或TF与DNA的结合，从而可以YZ内源基因的转录，若将dCas9/gRNA复合物结合在转录区域就可以阻止转录本的延伸，同样可以达到YZ基因表达的目的。若将dCas9与具有转录YZ结构域的KRAB蛋白融合，获得的dCas9-KRAB具有更强的YZ效果，具有转录YZ活性的CRISPR-dCas9系统，简称CRISPRi系统。

CRISPRi系统是在DNA水平实现基因的转录YZ，而RNAi技术主要在转录后水平或翻译水平YZ基因的表达，因此CRISPRi可以作为RNAi技术的补充手段YZ基因的表达。同时CRISPRi亦可以YZlncRNA、miRNA、反义RNA、核内RNA、RNA聚合酶等，较RNAi应用更为广泛。

CRISPR/Cas9系统转录YZ原理：dCas9与转录YZ域KRAB融合，表达的融合蛋白在gRNA介导下结合到启动子区，并通过KRABYZPolII与启动子的结合，从而YZ基因的转录。

合生基因提供从生物信息学分析、基因编辑分子实验、细胞实验、动物模型制作的一站式技术服务，经我们优化的KBAB系统适用于任何基因的靶位点及哺乳动物细胞。合生基因开发的dCas9-KRAB系统，可实现单个基因的转录YZ，也可以通过构建gRNA文库，实现某一基因网络的转录YZ调控，用于基因功能的研究及靶基因的筛选。合生基因拥有一支具有丰富CRISPR基因编辑经验的技术团队，目前可以实现包括gRNA设计、CRISPR/Cas9载体构建、细胞转染、阳性克隆鉴定、单克隆细胞培养、基因转录YZ细胞系构建等服务。服务完成后，我们将交付给您指定基因转录YZ的单克隆细胞株及详细的鉴定报告。