一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次

一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。

兔p53(p53)elisa试剂盒 Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T

兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 96T/48T

兔阿霉素(ADR)ELISA试剂盒Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit96T/48T

兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit96T/48T

兔抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit96T/48T

兔血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit96T/48T

兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit96T/48T

兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒 Rabbit soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit96T/48T

兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit96T/48T

兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit96T/48T

兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit96T/48T

兔血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒Rabbit Fibrinogen,Fbg ELISA Kit96T/48T

兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒Rabbit D-Dimer,D2D ELISA Kit96T/48T

兔子白介素1可溶性受体I (IL-1sR Ⅰ)ELISA试剂盒Rabbit soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sR Ⅰ ELISA Kit96T/48T

兔钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA试剂盒Rabbit Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 96T/48T

兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA试剂盒Rabbit prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit 96T/48T

兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒Rabbit soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit96T/48T

兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒Rabbit soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit96T/48T

一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit 96T/48T

兔载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 Rabbit Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 96T/48T

兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Rabbit apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T

兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit96T/48T

兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 Rabbit nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit 96T/48T

兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T

兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA Kit 96T/48T

兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒Rabbit urokinase plasminogen activator,uPA ELISA Kit 96T/48T

兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 96T/48T

兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 Rabbit matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit 96T/48T

兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit96T/48T

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒Rabbit　Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit96T/48T

兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒Rabbit β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit96T/48T

兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒Rabbit neutrophil elastase,NE ELISA Kit96T/48T

兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒Rabbit Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit96T/48T

兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit 96T/48T

兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit96T/48T

兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试剂盒 Rabbit major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠ ELISA Kit96T/48T

兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T

兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒Rabbit B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒Rabbit pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit96T/48T

兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒Rabbit anti-glycoprotein antibody,GP ELISA Kit96T/48T

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒Rabbit anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit96T/48T

兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit96T/48T

兔抗平滑肌抗体(ASMA) ELISA试剂盒Rabbit Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit96T/48T

兔子白介素9(IL-9)ELISA试剂盒 Rabbit Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 96T/48T

兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 Rabbit apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 Rabbit plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit96T/48T

兔纤溶YZ因子/凝血酶激活的纤溶YZ物(TAFI)ELISA试剂盒Rabbit Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit96T/48T

兔子白介素2(IL-2)ELISA试剂盒Rabbit Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit96T/48T

兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit96T/48T

兔一氧化氮(NO)ELISA试剂盒Rabbit nitric oxide,NO ELISA Kit 96T/48T

兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit96T/48T

兔p物质(SP)ELISA试剂盒Rabbit Substance P,SP ELISA Kit96T/48T

兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒Rabbit Laminin,LN ELISA Kit96T/48T