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可保种型蓝白 T 载体50ng

产品信息
可保种型蓝白 T 载体50ng存放时间不能超过该温度下的Z长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到的温度。
可保种型蓝白 T 载体50ng运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法 
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
可保种型蓝白 T 载体50ng5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。
可保种型蓝白 T 载体50ng产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由大肠杆菌 K12 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
猫表皮生长因子(EGF)ELISA KitCat Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit
猫白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KitCat Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
猫白介素6受体(IL-6R)ELISA KitCat interleukin 6 receptor,IL-6R ELISA Kit
猫白介素6(IL-6)ELISA KitCat Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
猫白介素4(IL-4)ELISA KitCat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
猫白介素2(IL-2)ELISA KitCat Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit
猫白介素12(IL-12)ELISA KitCat Interleukin 12,IL-12 ELISA Kit
猫α干扰素(IFN-α)ELISA KitCat Interferon α,IFN-α ELISA Kit
猫p27核心抗原(P27)ELISA KitCat p27 core antigen,P27 ELISA Kit
猫5羟色铵/血清素/血清铵(5HT/ST)ELISA KitCat 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
马ELISA Kit
马转化生长因子β2(TGFB2)ELISA KitHorse transforming growth factor beta 2,TGFB2 ELISA kit
马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KitHorse Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
马孕激素/孕酮(PROG)ELISA KitHorse Progesterone,PROG ELISA kit
铵2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA KitHorse Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1 ELISA kit
马甘油三酯脂酶(PNLIP)ELISA KitHorse Pancreatic triacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit
马血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA KitHorse platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA kit
马血纤蛋白原(Fbg)ELISA KitHorse Fibrinogen,Fbg ELISA Kit
马血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA KitHorse Serum Amyloid A,SAA ELISA Kit
马血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA KitHorse Vascular Endothelial Cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit
马血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA KitHorse angiotensin II,ANG-Ⅱ ELISA kit
马维生素C(VC)ELISA KitHorse vitamin C,VC ELISA Kit
马维生素A(VA)ELISA KitHorse Vitamin A,VA ELISA Kit
马铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD1)ELISA KitHorse Superoxide dismutase[Cu-Zn](Cu/Zn-SOD/SOD1)ELISA kit
马双氢睾酮(DHT)ELISA KitHorse Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
马乳酸脱氢酶(LDH)ELISA KitHorse lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
马热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)ELISA KitHorse Heat shock protein HSP 90-alpha,HSP90AA1 ELISA kit
马缺氧诱导因子α亚基(HIF3A)ELISA KitHorse hypoxia inducible factor 3,alpha subunit,HIF3A ELISA kit
马缺氧诱导因子1,α亚基(HIF1A)ELISA KitHorse hypoxia inducible factor 1,alpha subunit,HIF1A ELISA kit
马去甲肾上腺素(NE)ELISA KitHorse norepinephrine,NE ELISA kit
马前列腺素F2α(PGF2α)ELISA KitHorse Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit
马前列腺素E2(PGE2)ELISA KitHorse Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit
马皮质酮(CORT)ELISA KitHorse Corticosterone,CORT ELISA kit
马皮质醇(COR)ELISA KitHorse cortisol,COR ELISA kit
马内皮素1(EDN1)ELISA KitHorse Endothelin-1,EDN1 ELISA kit
马内皮PAS结构域蛋白1(EPAS1)ELISA KitHorse endothelial PAS domain protein 1,EPAS1 ELISA kit
马免疫球蛋白G(IgG)ELISA KitHorse Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
马锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD/SOD2)ELISA KitHorse Superoxide dismutase [Mn],mitochondrial(Mn-SOD/SOD2)ELISA kit
马可的松ELISA KitHorse Cortisone ELISA Kit
马结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA KitHorse Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit
马窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA KitHorse Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
马黄体生成素(LH)ELISA KitHorse luteinizing hormone,LH ELISA kit
马环磷酸腺苷(cAMP)ELISA KitHorse cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
可保种型蓝白 T 载体50ng马环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA KitHorse cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
马过氧化氢酶(CAT)ELISA KitHorse Catalase,CAT ELISA kit
马谷胱甘肽还原酶(GSR)ELISA KitHorse glutathione reductase,GSR ELISA kit
马睾酮(T)ELISA KitHorse Testosterone(T)ELISA Kit
马促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA KitHorse adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit
马促卵泡素(FSH)ELISA KitHorse follicle stimulating hormone,FSH ELISA kit
马雌激素(E)ELISA KitHorse Estrogen(E)ELISA kit
马丙二醛(MDA)ELISA KitHorse malondialdehyde,MDA ELISA Kit
马白三烯B4(LTB4)ELISA KitHorse Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
马白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KitHorse Interleukin 8,IL-8 ELISA KIit
马白介素6(IL-6)ELISA KitHorse Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
马白介素4(IL-4/CXCL4)ELISA KitHorse Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
马白介素1β(IL-1β)ELISA KitHorse Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit
马白蛋白(Albumin)ELISA KitHorse Albumin ELISA Kit
马C反应蛋白(CRP/PTX1)ELISA KitHorse C-reactive protein,CRP/PTX1 ELISA kit
马17羟孕酮(17-OHP)ELISA KitHorse 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
鸡ELISA Kit
鸡转录因子AP-1(AP-1)ELISA KitChicken Transcription Factor/Activator Protein 1,AP-1 ELISA Kit

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