一:合成 PCR 用的 1st-strand cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系:RNA RNA 100-500 ng poly(A) mRNA 10-500 ng或专一的 RNA 0.01 pg-500 ng
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或 RNA 模板专一性引物 15-20 pmol
注意:随机引物与 RNA 模板的比例跟 cDNA 合
成的平均长度成反比。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20 uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,不需要纯化。产品及特点:
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)GX合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. Z长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
CEP170ZX体蛋白CEP170抗体
CDX4尾型同源盒转录因子4抗体
CUTC铜转运蛋白CUTC抗体
CUTL1CUTL1蛋白抗体
CTNS胱氨酸抗体
CTRB1胰凝乳蛋白酶B抗体
CTRP2补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白2抗体
CSTF3细胞分化促进因子77抗体
CSTL1半胱氨酸蛋白酶YZ剂样蛋白1抗体
CTBSCTBS蛋白抗体
CSGALNACT1硫酸软骨素β1/β-1,4-GalNAc-T抗体
CSGLCAT硫酸软骨素聚合酶3抗体
Placental lactogen I+II胎盘催乳素1/2抗体
CSK酪氨酸激酶C-SRC抗体
phospho-CSK (Ser364)磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体
CSNK1A1L酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗体
CSP半胱氨酸延伸蛋白α抗体
CSPS磺基转移酶CSPS抗体
CSRP2富含半胱氨酸蛋白2抗体
CRTAC1软骨酸性蛋白1抗体
CSRP2BP富含半胱氨酸蛋白结合蛋白抗体
CRTC3CREB调节转录激活因子3抗体
CRTAP软骨相关蛋白CRTAP抗体
C1orf1001号染色体开放阅读框100抗体
C1orf1041号染色体开放阅读框104抗体
C1orf1121号染色体开放阅读框112抗体
C1orf1131号染色体开放阅读框113抗体
C1orf114 1号染色体开放阅读框114抗体
C1orf1091号染色体开放阅读框109抗体
CD93CD93抗体
C1orf110 1号染色体开放阅读框110抗体
C1ORF111 1号染色体开放阅读框111抗体
C1orf1061号染色体开放阅读框106抗体
CYP11A1细胞色素P450 11A1抗体
phospho-CXCR4 (Ser339)磷酸化细胞表面趋化因子受体4抗体
phospho-CXCR2 (Ser347)磷酸化细胞表面趋化因子受体2抗体
CEP104ZX体蛋白104抗体
CEPT1胆碱/乙醇胺磷酸转移酶1抗体
C6orf1636号染色体开放阅读框163抗体
C6orf1656号染色体开放阅读框165抗体
C6orf1686号染色体开放阅读框168抗体
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次C6ORF1736号染色体开放阅读框173抗体
C6ORF1826号染色体开放阅读框182抗体
C6orf186 6号染色体开放阅读框186抗体
C6orf1916号染色体开放阅读框191抗体
C6orf195 6号染色体开放阅读框195抗体
C6ORF1996号染色体开放阅读框199抗体