JM108化学感受态细胞 JM108 Chemically Competent Cell

JM108化学感受态细胞

JM108 Chemically Competent Cell

JM108化学感受态细胞基本信息：

JM108基因型:

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (r_K^- m_K⁺)

JM108菌株介绍：

nalidixic acid resistant.
deficient in expression of the lon protease due to IS186 transposon insertion.

JM108使用说明

1.         本产品采用干冰运输，收到后请直接冻存于-80℃冰箱。

2.         取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化；

3.         加入1μl纯质粒，轻轻吹打混匀，冰浴30min；

4.         将菌液放入42℃水浴中热激45sec，立即放入冰浴中2min；

5.         加入900μl SOC/LB培养基，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育；

6.         将菌液5000rpm×5min离心，弃尽上清；

7.         取100μl新鲜LB培养基将菌体打散，均匀涂布于对应抗性平板表面；

8.         平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕，再倒置37℃培养过夜。

JM108注意事项

1.         为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.         本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。

3.         混入质粒或连接产物时应轻柔操作，感受态细胞Z好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

4.         涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

5.         新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养.

6.         涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。