大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)促销

名称：大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)促销
品Pai：百奥莱博
英文名：Enterokinase, Recombinant, Expressed in E.coli
编号：SY0369
产地：国产|进口
规格：100U
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性，切割位点AspAspAspAspLys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，本rEK具有比天然酶更高的切割活性。

本品为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，适用范围广，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，故后续不需将其去除。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。
来源：E. Coli
分子量：25.850 kDa 
外观：无菌液体
酶浓度）：10000U/ml，相当于10U/ul
活性定义：一个活性单位定义为25 ℃，12~16h，在25mM Tris-HCl，pH8.缓冲体系下，将500μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量。
内毒素检测：用LAL法测定内毒素含量小于1EU/μg
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。
常见影响肠激酶活性的因素：>2M 尿素，>200mM NaCl，>20mM β-ME，>0.1% SDS，>50mM 咪唑，或>5% 甘油
【注】：如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释，使得各组分低于干扰浓度后再酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。

1）反应体系（1000μl）

融合蛋白———0.5-1mg（蛋白浓度：0.1-1mg/ml）
Enterokinase——————————————1-2U
10×rEK Reaction Buffer————————100μl
补DDW（超纯水）——————————To 1000μl

2）反应条件： 25 ℃过夜酶切（注：完全酶切需要16-24h）。
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
【注】重组肠激酶可使用25mM Tris-Hcl pH8.0稀释成每1μl含0.1单位的溶液使用。

特别注意事项
1）磷酸盐对Enterokinase有很强的YZ作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
2）本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。
3）蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
4）本品仅作科研用途！为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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·高分辨率琼脂糖(PCR级)
编号：SY0256
英文名称：High Sieving Agarose
规格：5g
琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

本品为PCR级高分辨率琼脂糖，对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率，适宜分离20bp-800bp的DNA*(代＇片＇)段，其分离效果可与聚丙烯酰胺相媲美。此外，还具有如下特点：
1）易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；
2）很低的背景；
3）品质稳定等。

琼脂糖的基本参数，包括：

1） 硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；
2） 凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；
3） 胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。
4） 电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

产品性质

CAS：	39346-81-1
外观（Appearance）	白色粉末
凝胶强度（Gel Strength）	≥750g/cm2（1.5% gel）
凝胶温度（Gel Point）	≤33℃（1.5% gel）
融胶温度（Melting Point）	≤70℃（1.5% gel）
电渗值（EEO, -mr）	≤0.10
外观（Appearance）	无色清澈胶液
硫酸盐（Sulfate, %）	≤0.10%
水分：	≤10%
灰分（Ash Content）	≤0.5%
DNA酶（DNase）	Not detected
RNA酶（RNase）	Not detected
蛋白酶（Protease）	Not detected
核酸内切酶（Endonuclease）	Not detected

使用方法

1）配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。【注意】：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2）根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。
3）在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约 30s，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1分钟（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】：必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4）使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml，并充分混匀。
【注意】：溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时，请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品（YeaRed 核酸染料，Cat# 10202），使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5）将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6）在室温下使胶凝固（大约30min-1h），然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存 2～5天。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

线性DNA*(代＇片＇)段大小（bp）	20-250	50-500	100-1200	500-2000
琼脂糖浓度（%）	5.0	4.0	3.0	2.0

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