规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
细胞介绍
此细胞株源自肺粘膜上皮细胞癌的淋巴结转移灶。这个细胞系用化学合成培养基分离得到,并转换成含血清培养液培养。此细胞在培养时在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特性,并表现出鳞状分化的多种标记。
细胞特性
来源:肺
形态:上皮细胞样,贴壁生长
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理:
收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程,供参考
一.培养基及培养冻存条件准备:
准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
细胞处理:
复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
人肺癌细胞(淋巴结转移)上海直销操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
野甘草Scoparia dulcisKolavenol仙茅苷19941-83-4C37H40N2O6
野马追Eupatorii Lindleyani Herba2-Oxokolavenol仙茅木酚素130395-82-3C37H40N2O6* 2HCl
野马追Eupatorii Lindleyani HerbaNeosperidin dihydrochalcone纤细薯蓣皂苷20702-77-6C37H42N2O6
人肺癌细胞(淋巴结转移)上海直销野扇花Sarcococca ruscifoliaCinene莶精醇138-86-3C37H42N2O6
野扇花Sarcococca ruscifoliaHesperetin腺华素520-33-2C37H42N2O6
叶底珠Securinega suffruticosaBrachynoside heptaacetate腺嘌呤核苷(腺苷)144765-80-0C37H42N2O6
叶底珠Securinega suffruticosaCleroindicin B香草醇107389-91-3C37H42N2O6
叶龙胆Gentiana manshurica KitagCleroindicin F香草酸189264-47-9C37H42N2O6. 2(HClO4)
叶下珠Herba Phyllanthi Urinariae22-Dehydroclerosterol香橙素,香树素26315-07-1C37H42N2O6. ClHO4
夜香牛Vernonia cinereaSitosteryl palmitate香豆素2308-85-2C37H44O11
夜香牛Vernonia cinerea3,5,6,7,8,3’,4’- heptemthoxyflavone香蜂草苷1178-24-1C37H46O12
夜香牛Vernonia cinereaDemethylnobiletin香柑醇2174-59-6C37H46O15
夜香牛Vernonia cinereaAsperuloside香荆芥酚14259-45-1C37H48O13
一年蓬Erigeron annuusAliarin香兰素84294-77-9C37H56O11
一文钱Stephania delavayi3,5-Diprenyl-4-hydroxybenzaldehyde香蒲新苷52275-04-4C37H58O12
一文钱Stephania delavayi3,6-Dimethoxyapigenin香叶草基松柏醇22697-65-0C37H60O8
一文钱Stephania delavayiDodonolide香叶木素-7-O-葡萄糖苷349534-73-2C37H62O7
一文钱Stephania delavayiDodoviscin A香紫苏醇1372527-25-7C38H32O15
一文钱Stephania delavayiDodoviscin H香紫苏内酯1372527-39-3C38H42N2O6
一叶萩Securinega suffruticosaDodoviscin I消旋山莨菪碱1372527-40-6C38H42N2O6
依兰Cananga odorataHautriwaic acid小白菊内酯18411-75-1C38H42N2O6
异型南五味子 Kadsura heter℃lita [Syn. Uvaria heter℃lita].15-Methoxymkapwanin小檗胺1309920-99-7C38H42N2O7
益母草 Leonurus sibiricusMethyl dodonate A小檗红碱349534-70-9C38H44N2O6
益母草 Leonurus sibiricusMethyl dodonate A acetate小檗碱, 黄连素碱349487-98-5C38H44N2O6
益母草Leonurus japonicusMethyl dodovisate A小构树醇 B1246937-33-6C38H44O11