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趋化因子ELISA试剂盒,人CXC趋化因子配体16ELISA试剂盒

产品信息
人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
   性能特点
一、“人CXC趋化因子配体16(CXCL16)elisa试剂盒”特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
二、试剂的准备之结果判断竞争法
在竞争法 ELISA 中,阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争YZ物的量,一般调节阴性对照的吸光度在 1.0-1.5 之间,此时反应Z为敏感。竞争法 ELISA 不易用自视判断结果,因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异,一般均用比色计测定,读出S、P 和N 的吸光值。计算方法主要也有两种,即阳性判定值法和YZ率法。
a. 阳性判定值法
与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同,但在计算公式中引入阳性对照 A 值,现举某种检测抗HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗HBc 的复钙人血浆,阳性对照中抗HBc 含量为125±100u/ml。每次试验设2 个阳性对照和3 个阴性对照。测得A 值后,先计算阴性对照A 值的平均值(NC X )和阳性对照A 值的平均数(PCX),两个平均数的差(N-P)必须大于一个特定的数值(例如0.300),试验才有效。3 个阴性对照 A 值均应小于2.000,而且应≥0.5×NCX 并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范围,则弃去,而以另2 个阴性对照重新计算×NCX;如有2 个阴性对照A 超出以上范围,则该次实验无效。阳性
判定值按下式计算:
阴性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
标本 A 值≤阳性判定值的反应为阳性,A>阳性判定值的反应为阴性。
b. YZ率法
YZ率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的YZ程度,按下式计算:
YZ率(%)= (阴性对照A 值-标本A 值)×/阴性对照A 值一般规定YZ率≥50%为阳性,<50%为阴性。
操作流程
三、人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒操作步骤
(1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
(2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
(3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
(4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
(5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
(6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
(7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
(8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
(9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
常见问题
四、“人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒”常见问题
实验中Z可能出现问题 
一、所有孔未显色?
分析原因: 
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。 
2、用错试剂。 
3、在操作中忘记加酶或抗体。 
解决办法: 
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。 
2、在加样前,要看清瓶签。 
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。 
二、所有孔显色偏低?
分析原因: 
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。 
2、洗板不干净。 
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。 
4、温度没达到要求。 
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。 
解决办法: 
1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。 
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。 
3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。 
4、控制孵育温度在25℃。 
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。 
客户好评
五、人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒客户评价
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