乙酰胆碱酯酶（AchE）测试盒-可见分光光度法

乙酰胆碱酯酶（AchE）测试盒-可见分光光度法

试剂一 液体×1 瓶 4℃保存。 试剂二 液体×1 瓶 4℃保存。 试剂三 粉剂×1 瓶 4℃保存 临用前加入2.6mL 试剂二 充分震荡溶解。 试剂四 粉剂×1 瓶 4℃保存 临用前加入2.6mL 试剂二 充分震荡溶解。
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工作原理：
AchE催化Ach水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm 处有吸收峰，通过测定412 nm 吸光度增加速率，计算AchE活性。
测定意义：
AchE属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE 催化乙酰胆碱（Ach）水解，在神经传导调节中起重要作用。
标本处理：
1. 组织：按照组织质量（g）:提取液体积(mL)为1:5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织?加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，10000rpm 4℃离心10min，取上清液，待测。
2. 血清:直接测定。
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注意事项：乙酰胆碱酯酶（AchE）测试盒-可见分光光度法
 影响显色反应的主要因素有哪些？
    影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶液的酸度、显色时间以及干扰离子等。
    为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择Z适宜的测量条件？
    一般从以下几个方面来考虑：
    ①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择吸收波长作为测量波长
      。如果干扰组分在吸收波长也有吸收,则应根据：吸收大，干扰小”的原则来选择测量
      波长
    ②调价溶液的浓度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内
    ③选择适当的参比溶液。
 在分析复杂样品时，如何消除干扰？
 消除干扰方法主要有：
    1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如
          加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
    2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。
    3、采用双波长或其他选择性的方法；
    4、分离干扰离子。
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试剂四：液体5mL×1 瓶，4℃保存。

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