YT531型RNaseYZ剂(氧钒核糖核苷复合物)厂家

名称：YT531型RNaseYZ剂(氧钒核糖核苷复合物)厂家
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：RNase Inhibitor(RVC)
本YZ剂氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的RNA酶YZ剂，浓度为200mM，广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以YZRNA降解。

本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成，可以和RNase以非共价键结合，形成稳定的复合物，从而YZRNase活性。

本产品是一种常用的RNaseYZ剂，可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中，作为RNase的YZ剂；也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中，以YZRNase活性；还可以用于原位杂交中保护RNA探针，以及DNase I消化DNA时保护RNA等。但本产品不适合用于体外翻译体系。

本产品可以YZ绝大多数核糖核酸酶，但以下是例外：DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereusribonuclease。由于本产品不YZDNase I，所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时，可以采用本产品来YZRNase。

有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的YZ作用，所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中，反转录体系中可以选用百奥莱博的另外一种RNaseYZ剂(YT530)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。

很多时候RNA样品中的RVC不必去除，可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如，使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC，可以直接用于蛙卵的注射实验。

如果需要去除RNA样品中的RVC，可以直接使用等体积苯酚进行抽提。如果苯酚中含有抗氧化剂8-羟基喹啉(8-hydroxyquinoline)，抽提含有RVC的RNA样品后会发现苯酚的颜色会变黑。当苯酚抽提样品2-4次后，苯酚的颜色不再明显变色，提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前，加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC，这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。RVC浓度越高，对于RNase的YZ效果越强。参考图1，20mM的RVC可以完全YZ0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM，一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM，也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性YZ的检测，检测结果参考下图。


不同浓度的RVC对RNase A的YZ效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能和上图有所差别。

注意事项：
1. 次使用时建议分装，避免反复冻融。
2. 去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以YZRVC的活性，请勿和RVC同时使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。

欲咨询购买YT531型RNaseYZ剂(氧钒核糖核苷复合物)厂家，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供Z全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·C端HA标签融合蛋白质粒
编号：YT470
英文名称：C-HA plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端与HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以GX启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3＇端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter ａnd T3 primer binding site	620-639
multiple cloning site	680-740
c-HA tag	741-767
T7 promoter ａnd T7 primer binding site	820-841
SV40 polyA signal	853-1236
f1 origin of ss-DNA replication	1374-1678
bla promoter	1703-1827
SV40 promoter	1847-2185
neomycin/kanamycin resistance ORF	2220-3011
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3012-3470
pUC origin	3599-4266

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。


YT531型RNaseYZ剂(氧钒核糖核苷复合物)厂家