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北京Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)价格

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名称:北京Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)价格
品Pai:百奥莱博
英文名:Rb-luc Reporter gene plasmid
产地:国产|进口
规格:1μg
编号:YT454
Rb报告基因质粒是用于检测Rb(retinoblastoma protein)转录YZ活性水平的报告基因质粒。Rb质粒是以pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个Rb结合位点,可以高灵敏度地检测Rb的转录YZ活性水平。Rb可以和E2F等转录因子结合,YZ这些转录因子的激活,YZ细胞周期的进展。Rb同时也可以作为一个YZ性转录因子直接结合到其响应的顺式作用元件,YZ该基因的转录。

pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到。

Rb质粒的主要信息如下:

Base pairs 5677
Rb response element 32-91
Minimal TA promoter (pTA) 114-136
luc2 reporter gene 178-1830
SV40 late poly(A) signal 1865-2086
SV40 early enhancer/promoter 2134-2552
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region 2577-3371
Synthetic poly(A) signal 3396-3444
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3511-3530
ColE1-derived plasmid replication origin 3768
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4559-5419
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5524-5677
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5626-5645


Rb质粒的图谱如下:



使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. Rb质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。

储存条件:-20℃。
北京Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)价格
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·细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)
编号:YT358
英文名称:Fura-2 pentakis ester
规格:50微升
本品是Z常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。 用于细胞内钙离子检测时,Fura-2 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的适当溶液和细胞一起在4-37℃孵育15-60分钟,即可完成荧光探针的装载。 本Fura-2 AM(钙离子荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为2mM。

分子式:C44H47N3O24
分子量:1001.9

Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM的荧光比较弱,激发波长为369nm,发射波长为
478nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2,从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后,激发波长为335nm(激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为340nm和380nm。Fura-2的激发光谱参考下图,不同曲线表示不同钙离子浓度时的激发光谱。



Fura-2相对而言有较强的抗荧光淬灭能力,在荧光显微镜或其它荧光检测设备上可以连续检测1小时而不明显影响其荧光效果。

注意事项:
1. 本Fura-2 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

储存条件:-20℃,有效期6个月。


北京Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)价格
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