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小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书

产品信息
小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书对于悬浮细胞传代方法：方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞名称 小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
CHYMOTRYPSIN胰凝乳蛋白酶蛋白组学级5G9004-7-3Frozen
994-30-9三乙基录硅烷Chlorotrietxylsilane
TOTALBLOT+10CMX10CMTOTALBLOT+ 带正电尼龙膜010 x 10 square cmRT
4-溴-2－－1-苯 4-Bromo-2-chloro-1-fluorobenzene,99% 60811-21-4 5G 通用试剂
聚蔗糖400/可400/蔗糖与环氧丙烷的聚合物/蔗糖与甲基环氧的聚合物/Ficoll400 BR，分子量40万 10克 Pharmacia 17-0400-01
黄胶，英文名或英文缩写：Xanthan gum，级别：GR，99.8%，规格：10克
7440-9-7钾potewwium
乙酰醋酸甲酯，英文名或英文缩写：MAA，级别：SP，99.5%，规格：500克
菊粉酶 inulinase (50万U/克) 9025-67-6 1G 通用试剂
本基丁二醋 DL-Phqnylsuccinic ccid 632-21-8
甲位紫罗兰酮，英文名或英文缩写：α-Io，级别：CP，99%，规格：1公斤
1953-6-5可的松;肾上腺皮质激素;11-去氢-17-羟基皮质酮Cortisone;17α,21-Dixy7noxy-4-pregnene-3,11,20-trione;11-Dexy7no-17-xy7noxycorticosterone
固紫B盐，英文名或英文缩写：Fast Violet B Salt，级别：试剂级，90%，规格：10克
对硝基苯 4-Nitrobenzonitrile,97% 619-72-7 25G 通用试剂
小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书羊抗鸡IgG (FITC标记) Anti-Chicken IgG-FITC antibody produce... Null 1ML FITC荧光抗体
煌绿肉汤增菌液基础250g用于蛋与蛋制品中沙门氏菌的增菌培养
PEA琼脂 250g 用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌
TTC 琼脂基础 TTC Agar Base 250 用于弯曲杆菌的TTC试验(GB标准)
石蕊牛乳培养基250g/瓶用于测定细菌对牛乳的发酵incubationmedia石蕊牛乳培养基250g/瓶用于测定细菌对牛乳的发酵
CIN-1琼脂平板(9cm) 10个/包 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌
SulfiteCycloserineAgarBase
肠毒素产毒培养基 Enterotoxin toxin-producing medium 用于金黄色葡萄球菌肠毒素产毒试验
BCYE 琼脂(Legionella 琼脂) BCYE Agar(Legionella Agar) 250 用于军团菌的选择性分离培养(OXOID方法)
哥伦比亚琼脂培养基250g/瓶用于梭菌的检验，每培养基中添加0ncubationmedia哥伦比亚琼脂培养基250g/瓶用于梭菌的检验，每培养基中添加0102
MR-VP培养基 250g 用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准)
 注意事项：
1. 收到 小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海谷研实业有限公司），内容包括 （小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （小鼠淋巴结血管上皮细胞；F-2B说明书）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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