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显色培养基大肠杆菌O157选择性(国标)

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肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌(VTEC/EHEC)。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素(3),但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的Z常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。
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MV157

HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified(需添加剂FD187)

100G,500G

2-8℃密闭

FD187

HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement

5VL

2-8℃

 

原理                                                       

肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌(VTEC/EHEC)。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素(3),但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的Z常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。

 

该款显色培养基采用植物源蛋白胨,以取代动物源,避免了BSE/TSE风险。它基于 Rappaport 和Henigh(1)描述的配方而成。培养基含山梨醇和显色混合剂,不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌O157:H7 特异性裂解,产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。

 

培养基中的HiVeg水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性(2)。添加剂中的亚碲酸钾选择性YZ气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素YZ革兰阳性菌。月桂基硫酸钠YZ伴随的革兰阳性菌群。

 

培养基成分                                                    

组成            G/L

HiVeg水解物   5.000

酵母粉        3.000

山梨醇        7.000  

合成离子活性剂1号 1.500

月桂基硫酸钠   0.100

显色混合剂     0.250

琼脂           15.000

pH(25°C) 6.8±0.2

 

 

配制                                                                                  

31.85g溶于990ml蒸馏水,加热至沸使完全溶解。高压灭菌后,冷却至45-50℃,无菌加入复溶的添加剂(货号FD187,先用10ml蒸馏水复溶)。混匀并倾注平板。

 

质量控制                          

外观:奶油色至黄色均一自由粉末

成胶性: 牢固,与1.5%琼脂相当

制备好的培养基颜色和透明度:在平皿中为浅琥珀色,透明至轻微不透明凝胶

配比反应:25°C下3.18% w/v水溶液,pH值为6.8±0.2

pH值要求:6.60-7.00

培养反应:

加入添加剂(货号FD187)后,在35-37°C培养18-24小时,观察如下:

 

菌种

接种量(CFU)

生长状况

回收率

菌落颜色

大肠杆菌ATCC 25922

50-100

生长很少

≤10%

蓝绿色

大肠杆菌O157:H7 NCTC 12900

50-100

旺盛

≥50%

深紫-洋红色

肺炎克雷伯菌

ATCC 13883

50-100

一般-好

30-40%

无色-淡紫色(黏液状)

铜绿假单胞菌

ATCC 27853

50-100

一般-好

30-40%

无色

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

≥103

YZ

0%

 

枯草芽孢杆菌

ATCC 6633

≥103

YZ

0%

 

 


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