布鲁氏杆菌IgG试剂盒

通用名称：布鲁氏杆菌IgG 检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Brucella IgG ELISA

布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒预期用途
布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒可用于人血清和血浆中布鲁氏杆菌IgG抗体的定性和定量检测。

样品采集与储存
血清，血浆（EDTA，肝素）
布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒检测原理
布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒储存与稳定性
布鲁氏杆菌IgG检测试剂盒成分
★包被板（1×12×8）可拆，包被有特异性抗原。
★标准品A-D（1×4×2ml）1；10；40；150U/mL，即用
标准品A=阴性质控 ——标准品B=临界质控
标准品C=弱阳性质控——标准品D=阳性质控
★内含抗布鲁氏杆菌的IgG抗体，PBS（磷酸缓冲液），稳定剂。
★酶标IgG（1×15ml）红色，即用。内含辣根过氧化物酶标记的抗人IgG，蛋白缓冲液，稳定剂。
★稀释液（1×60ml）含PBS缓冲液，＜0.1%NaN3
★浓缩洗涤液（1×60ml）
★浓缩型（10×），含PBS缓冲液，吐温20
★TMB底物液（1×15ml）含TMB
★TMB终止液（1×15ml）0.5M的H2SO4
★封板纸——2×——用于在温育时遮盖包被板
★自封袋——1×——用于储存不用的板条

布鲁氏杆菌IgG检测实验所需材料但（试剂盒内不提供）

1. ☆移液器，体积：5；50；100；500 µL
2. ☆校准仪
3. ☆样品稀释用试管（1ml）
4. ☆带试剂储器8道移液器
5. ☆洗涤瓶，自动或半自动洗板机
6. ☆能在450nm处读数的酶标仪
7. ☆双蒸水或去离子水
8. ☆吸水纸，取样吸头和计时器

样品稀释
血清、血浆用稀释缓冲液按1:101比例稀释
例：5ul+500ul稀释缓冲液
如果样品中IgG浓度高于标准品则应进一步稀释。

布鲁氏杆菌IgG检测步骤

1. ☆加100µL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。
2. ☆封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。
3. ☆移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。
4. ☆在每一微孔中加入100µL酶联物。
5. ☆封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。
6. ☆移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。
7. ☆如果有条件的话，可使用8孔微量移液器加底物液和终止液，确保底物液和终止液都是以相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。
8. ☆每孔加TMB底物液100µL。
9. ☆室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。
10. ☆在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。
11. ☆加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。

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