GelRedTM核酸凝胶染色剂操作步骤

贮存和处置方法:    GelRed 10,000X in DMSO可在室温条件下储存一年以上。尽管并非必须，GelRed 依旧可以在低温、避光环境下长时间贮存。但在正常的室内光照实验条件下，该染色剂可以安全操作。
如果您目前使用的是SYBR(如SYBR Green 1/SYBR Gold)染色剂，并使用紫外投射器(UV transilluminator）来观察凝胶，那么您可以使用GelRed 替换SYBR染色剂，不需要更换现有的SYBR虑光片。
GelRed 既可用于前染(precast gel staining)，也可用于后染(post gel staining)。通常后染比前染能够获得更灵敏的特性，并能排除染色剂在电泳过程中对核酸条带分离造成任何影响的可能性。然而，前染较后染更为简单、经济，因为前染不需要额外的着色过程，并且染料用量更少。因此，假如灵敏度和条带清晰度不成问题，前染则是。我们强烈建议您尝试两种染色方法，以便根据您的需要选择ZJ的染色方法。
Cat#41000（GelRed Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO）为浓缩的 GelRed溶液。用于前染时，可稀释10,000倍后使用；用于后染时，建议您稀释3,300倍后使用，见具体操作步骤。

    1）前染法对DNA染色（precast gel staining）
1.1.    使用标准方法预备琼脂糖凝胶溶液
1.2.    将GelRedTM 10,000X in DMSO（41000）试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中，再用涡旋、搅拌或振摇的方法使染色剂与凝胶溶液充分混合即可。（例如：将5uL GelRedTM 试剂加入50mL 凝胶溶液中）。
备注： GelRedTM 适用于所有常用的电泳缓冲溶液。
1.3.    浇制凝胶并使其凝固

注意：使用这种预先参杂染色剂的琼脂糖胶体，每次不易加入太多的 DNA 样品，否则容易造成饱和现象，您可以做多个不同浓度的 DNA 标志（marker），以确定ZJ DNA 加载量。
1.5.    核酸显色用标准的(302nm)，并用Polaroid 667胶片和EB滤光片拍照。由于荧光处于红色光区域，SYBR 或 GelStar滤光片也可用于拍照，得到一样不错的结果。(见图1 GelRedTM 发射光谱和激发光谱)
注意：如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象，您可以使用后染法对DNA染色，以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在，则说明问题与染色剂无关，请尝试： 降低琼脂糖的含量； 减少核酸的加载量；改善试验方法和技巧。