PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别

在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：
2、模块与PCR管内温度平衡时间
4、循环次数

PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变温速度，也就是说是瞬间达到的速度。而与实验相关的平均升降温速度只有极少量厂家标明。以平均2度和4度（能做到平均升降温4度的仪器极少）来计算，从95度降到55度，分别是20秒和10秒，每一个循环差20秒钟。以一般35个循环来计算，影响实验时间700秒，也就是不到12分钟。实际还要考虑过冲问题，影响时间还会少些。
2、模块与PCR管内温度平衡时间

延伸时间与PCR产物的长度和DNA聚合酶的合成速度有关。如果PCR产物长度少于100bp时，可能考虑将延伸时间变为0（即两步法）；采用高速的DNA聚合酶也是常用的方法，但并不是所有PCR实验都可以用高速的DNA聚合酶。
4、循环次数

 

快速PCR技术与快速PCR仪是两回事。快速PCR仪zui多只能缩短PCR反应时间10分钟左右，要实现真正的快速PCR反应，还需要其他一些努力。大多数用户根本就不需要快速PCR技术。