PCR新手指南：Z佳复性温度的选择标准

PCR新手指南：zui佳复性温度的选择标准
zui佳复性温度的选择标准应该是可扩增范围的中间温度。
在使用温度梯度的方法寻找zui佳复性温度时，新手往往会选择扩增产物zui多的温度条件，然而在此后的非梯度扩增时扩增效果又不太理想。出现这种现象的主要原因是zui佳复性温度的选择标准不对。本人10多年前做过数千个基因的扩增，通过温度梯度实验发现，能扩增出来的温度范围一般在3-30度。选择的标准应该是可扩增范围的中间温度。
1、扩增产物量的影响因素很多，有些是随机的。从定量PCR的平台期高低的不规律可以看出来。
3、PCR仪进行梯度扩增时的温度准确性会更差

另外，进行温度梯度时模板量的选择也是非常重要的。