质粒DNA导入细菌细胞实验——CaCl2转化法

菌落质粒DNA

CaCl2

培养基平板

1.  接种一个单菌落于50 ml LB培养液中，于37°C中速摇床培养过夜（250 r/min)。

这一步的目的是使细菌快速生长（对数早期或中期）。

将合适体积的转化物（1、10和25 μl）涂于含有氨苄青霉素的LB平板上，37 °C培养过夜。

转化的大肠杆菌MC1061和DH1细胞一般可以产生105~108克隆数/μg DNA。

对氨苄青霉素来说，最适宜的密度是每个平板上的细胞≤500，这样是为了防止弱抗性的卫星菌落的生长。

收起 

1.  所有与细菌接触的物品和液体都应该是无菌的。