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蛋白质含量的测定实验——考马斯亮蓝法

实验方法原理

考马斯亮蓝G250 在酸性溶液时呈茶棕色, ZD吸收峰在465 nm。当与蛋白质结合后变成深蓝色, ZD吸收峰转至595 nm, 在1~100 μg/ ml 蛋白质浓度范围内成正比。

实验材料

蛋白质

试剂、试剂盒

考马斯亮蓝G250乙醇碳酸钠氢氧化钠硫酸铜酒石酸钠钨酸钠钼酸钠蒸馏水磷酸浓盐酸硫酸锂液体溴酚酞

仪器、耗材

722S 型分光光度计电子天平离心机容量瓶试管吸管

实验步骤

1.  样品的制备


按下表操作,A . FOLIN 酚法    B . 考马斯亮蓝法


(标: 标准蛋白质溶液, F : FOLIN 试剂: K: 考马斯亮蓝 G250 试剂。自己制备的蛋白质溶液测定含量时注意稀释度)

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注意事项

1.  蛋白质样品和呈色剂都不应有沉淀, 有沉淀应过滤除去。



2016-03-28
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