技术文章库

细胞生长曲线实验

细胞生长曲线可应用于:(1)测定细胞JD生长数;(2)判定细胞活力。

实验方法原理

细胞生长曲线是测定细胞JD生长数的常用方法,是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指数生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。

实验材料

细胞

试剂、试剂盒

D-Hanks液牛血清RPMI1640双抗0.08%胰酶

仪器、耗材

净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱吸管培养瓶吸头枪头24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板

实验步骤

1.  取生长状态良好的细胞,采用一般传代方法进行消化,制成细胞悬液。




注意事项

1.  细胞生长曲线虽然最为常用,但有时其反映数值不够精确,可有20~30%的误差,需结合其它指标进行分析。


2.  现在很多实验室利用培养板采用MTT法进行生长曲线测定,较为简便。

其他

1.  标准的细胞生长曲线近似“S”形,一般在传代后DY天细胞数有所减少,再经过几天的潜伏适应期,然后进入对数生长期,达到平台期后生长稳定,ZH到达衰老。


2.  在生长曲线上细胞数量增加1倍时间称为细胞倍增时间,可以从曲线上换算出。


2016-04-05
您可能感兴趣的技术文章