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QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) 12145 说明书

产品信息
QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) 12145
纯化至多100 μg转染级质粒或柯斯质粒DNA
纯化得到相当于2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度
高产量质粒DNA
经济的制备方法
使用LyseBlue,获得的裂解效果和的DNA产量
QIAGEN Plasmid Kits通过重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多100 μg质粒DNA。

 QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) 12145 说明书

转染效率与质粒纯化方法。
采用不同方法制备pRSVcat DNA,通过脂质体介导的转染将其导入指定的细胞系内,40小时后测定CAT表达水平,确定转染效率。每个柱形代表4个独立的转录的平均值(2个质粒制备物分别转染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可获得的转染效率。
 
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100阴离子交换柱GX纯化质粒DNA。只需25–100 ml培养基,即可纯化获得多达100 µg的高拷贝质粒DNA。(培养容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染(参见Transfection efficiency versus plasmid purification method)、克隆、测序和体外转录。
原理

QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。

操作流程

使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures)。纯化得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,通过离心收集。

应用

QIAGEN Plasmid Kits纯化得到的质粒DNA适合多种应用,如:

转染
克隆
PCR
 
体外转录

全国咨询热线:   13488645491   QQ774226171    联系人:梁经理


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