100μl×10 翊圣HieffTM快速转化超级感受态细胞

                       翊圣HieffTM快速转化超级感受态细胞

                                                                ——从2小时到10分钟

   感受态细胞是基因克隆和蛋白表达所必备的工具。感受态细胞的品质对于科研和工业生产是至关重要的。传统的感受态，转化效率低，转化时间长，严重影响了实验的进度和实验结果。为了解决这一问题，翊圣经过潜心研发，优化制备工艺，改良生产菌株，终于研发出了可以实现快速转化的超级感受态细胞。与传统方法制备的感受态相比，转化效率更高，更便捷的操作方法。满足您克隆和表达的所有需求。

HieffTM感受态细胞优势：

GX转化：转化效率＞108。

   操作简单：冰浴时间和37℃孵育时间大幅缩短。总时间从传统的2小时转化时间缩短至10min。

无抗性偏好：目前市场上快速转化感受态无法用卡那抗性，翊圣感受态氨苄和卡那抗性都可以使用。

HieffTM感受态细胞操作：

    Yeasen超级感受态的使用不同于传统感受态，10min便可以完成一次转化，并且转化效率＞108。过程详见图1。

图1：使用超级感受态进行外源DNA转化示意图

FAQ：

Q:翊圣HieffTM超级感受态可以用传统方法转化吗？

A：可以。不过用传统方法转化HieffTM超级感受态效率过高，有可能会导致挑取单克隆困难。一般只有遇到载体或者外源基因片段浓度低时，建议可以采用传统方法转化。对于一般克隆构建，建议使用快速转化方法。

Q:用传统方法和快速转化方法转化效率的差别有多大？

A: 传统方法转化效率大约5×108。快速转化方法的效率可以大约达到5×107左右。

Q:有的公司快速感受态可以去除42度热激步骤，Hieff 超级感受态是否可以？

A: 一般情况下，不建议省去。如果构建克隆时，载体浓度比较高，或者仅仅做简单质粒转化，可以省去热激步骤。

Q:如何选择克隆感受态细胞？

A:目的基因能否在大肠杆菌中稳定存在并进行大量复制受到大肠杆菌自身诸多因素的影响。核酸内切酶endA的缺失能够保证外源质粒不被降解从而提高质粒的产量和质量，recA基因的缺失可减少插入片段的同源重组率，保证外源质粒的稳定性，mcrA和mcrBC-hsdRMS-mrr基因的缺失，使得甲基化序列基因不被降解，有利于克隆甲基化的基因序列。

翊圣生物目前提供多种基因型不同的高转化效率克隆感受态细胞，满足不同的实验需求，如普通质粒的构建、重组质粒构建、高质量质粒提取、文库构建等。

Q:如何选择表达感受态细胞？

A:外源基因在感受态细胞中的大量表达需要强启动子的启动，如T7启动子。为此，将λ噬菌体的DE3区整合到BL21染色体上能够使其表达T7 RNA聚合酶，更适合含T7启动子质粒的蛋白表达。另外，增加大肠杆菌中缺乏的6种稀有密码子（AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA）对应的tRNA，更加适合真核基因的表达。

翊圣生物为您提供了目前应用Z为广泛的两款表达感受态细胞，均含有T7RNA聚合酶能有效识别T7启动子，在满足GX转化的基础上获得大量所需要的蛋白。

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