人脑胶质细胞瘤细胞系;SGH44细胞传代细胞

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人脑胶质细胞瘤细胞系;SGH44细胞传代细胞细胞培养注意如下：
【培养液出现沉淀，但pH值不变】用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培养基成分沉淀下来。冰冻保存培养液，用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后CJ，将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。
【培养液出现沉淀，同时pH 发生变化】细菌或真菌污染，丢弃培养物或用抗生素CJ。
【培养细胞不贴壁】胰蛋白酶消化过度；支原体污染；培养液中无贴壁因子，缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度，分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。
【悬浮细胞成簇】培养液中含钙、镁离子。支原体污染。蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放DNA，用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液，分离培养物，检测支原体。如发现支原体污染，丢弃培养物，用DNase I处理细胞。
【原代细胞培养物污染】原代培养组织在进入培养前已污染，培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。
【培养细胞死亡】培养箱内无CO2。培养箱内温度波动太大。细胞冻存或复苏过程中损伤。培养液渗透压不正确。培养液种有毒代谢产物堆积；检测培养箱内CO2检查培养箱内温度；取新的保存细胞种；检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压，换入新鲜培养液。
【培养细胞生长减慢】由于更换不同培养液或血清。培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。培养物中有少量细菌或真菌污染。试剂保存不当。

人脑胶质细胞瘤细胞系;SGH44细胞传代细胞决定要进行细胞培养，首先一定要有强烈的无菌意识!千万不要怕麻烦，心存伐幸，一旦被污染，所有付出都会前功尽弃。如果是实验新手一定要多方面请教，当然我们专业的技术人员，随时都可为您免费提供咨询。
下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染：
一、杆菌污染：培养基中加入抗生素可以减少此种污染，但也不是的。
二、支原体污染：传说中的黑焦虫，长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。
三、念珠菌污染：似乎无处不在，而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上，高倍镜下呈树枝状或葡萄状。
四、霉菌污染、比较常见的一种污染，常常来源于污染的空气、水和器械。
注意事项
1．传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次Z好只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材。培养用液应严格分开。 2．每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代。 3．如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BSS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的KJ素，并经常更换培养基等。

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关于传代有两种方式，贴壁细胞与悬浮细胞。贴壁细胞是指采用酶消化法传代，常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。而悬浮细胞是指此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。大家可结合实验情况和需要选择。