近红外活体成像染料 biotium Near-IR CF™ Dyes

Near-IR CF™ Dyes
荧光强度Z高、稳定的长波长染料。特别适合于活体动物体内成像


近红外 CF 染料是由 Biotium 公司科研人员开发的一组吸收和发射波长在 650 到 800nm 之间的荧光染 料。近红外 CF 染料是为蛋白标记开发的，荧光强度远比其他相似波长的商业化染料更高， 同时也更稳定。
近红外染料和传统的可见光染料相比有显著的优势。由于细胞和组织的自发荧光在近红外波段Z小，因此在检测复杂生物系统时，近红外染料能提供更高的特异性和灵敏度。同时，由于光波在近红外区段的组织透过性更好，因此近红外染料尤其适合体内荧光成像（活体成像）这一近几年迅速发展的新兴领域。另外，近红外染料也是细胞内/全细胞免疫印记和传统基于膜介质免疫印记的理想染料。

近红外 CF 染料作为新一代的长波长染料，代表了这一领域的重大突破。现有商业化的近红外染料，由于染料的过分聚集以及稳定性差，因而受制于荧光亮度有限的问题。得益于 Biotium 公司科研人员采用的创新型分子工程学技术，近红外 CF 染料克服了上述问题，从而比其他竞争产品具备了关键性的优势：近红外 CF染料荧光强度极高并且非常稳定。例如CF750 亮度高至可以在 633nm 处激发（即在吸收峰值的肩部激发），而此时在 770 nm 左右的荧光发射强度仍然高于基于APC的串联染料。因此，近红外 CF 染料特别适合于流式细胞仪的各种应用，从而可以避免串联染料稳定性等带来的问题。
另外，近红外 CF 染料拥有的结构特性，这使近红外 CF染料和其他竞争产品相比免疫源性更小。因此，在标记同一个蛋白时，可以连接更多的近红外 CF 染料以获得Z大的荧光亮度。同时，这样标记获得的蛋白复合物在体内的半衰期也更长。
后一点，由于近红外 CF 染料优异的溶解性和大于 95% 的活化程度，它的标记效率也远远高于其他近红外染料。

产品特点： 亮度: CF染料在亮度上达到或者超过Alexa Fluor和Cy 等其它商业化的染料. 光稳定性: CF染料的光稳定性在同类染料中. 特异性和体内稳定性:CF标记的抗体具有高度的特异性，同时还能延长抗体在体内成像时的半衰期. 对pH值不敏感: CF染料在很宽的pH值范围内都能维持高亮度的荧光. 溶解性: CF染料在水以及各种有机溶剂中有高度的溶解性. 兼容性:CF染料的光谱特性和其他商业化的染料相似，兼容常见的激发光 源和现有的各种滤片. 多种颜色可供选择: CF系列染料包括了从紫外到近红外的多种颜色的染料可供选择. 产品应用： 体内成像: CF活化染料和试剂盒非常适合活体成像（小动物体内成像技术） 免疫印记: 用高度交叉吸收后的抗体进行免疫印记可使交叉反应和背景降至Z低 蛋白标记: CF活化染料和试剂盒用于定制标记复合物 流式细胞仪: 优异的非串联标记复合物用于细胞染色 显微成像: 高亮度，光稳定的抗体和活化染料可用于多重标记

图 6. 用胞内CD3抗体或者同型对照孵育Jurkat 细胞并分别用1ug标记了Cy5.5，AlexaFluor680，CF680 或 DyLight680的山羊抗鼠 IgG 荧光二抗染色。用BD FACS Calibur流式细胞仪的FL4通道检测荧光。柱状图代表了CD3阳性荧光值和标记程度（DOL）相似的同型对照相比的信噪比。

图 5.分别用CF750，AlexaFluor750或Cy7标记山羊抗鼠IgG二抗。染料复合物的吸收光谱分别对各自的Z大吸收值做均一化。Cy7和AlexaFluor750染料有较大的肩峰，显示了染料的高度聚集，而这种聚集对整体荧光强度是没有贡献的。

图 8. 用胞内CD3抗体或者同型对照孵育Jurkat 细胞并分别用1ug标记了CF770，Dy­Light 800 或 IRDye800CW的山羊抗鼠 IgG 荧光二抗染色。用BD LSR II 流式细胞仪的633 nm激光器和780/60 nm PMT检测器分析荧光。柱状图代表了相对荧光值的几何均数。

图 7.用鼠抗alpha-tubulin作为一抗，标记了CF680的山羊抗鼠IgG作为二抗染色HeLa细胞。使用以汞电弧灯作为光源的Olympus显微镜拍照，使用Cy5 滤镜组，CCD相机和 ImagePro Express软件获取照片。
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图 9. 细胞数量2倍稀释的HeLa细胞培养在一块黑色侧壁，底部透明的96孔板中。将细胞固定、透膜并用鼠抗alpha-tubulin和兔抗COX IV分别作为一抗，选用CF770或IRDye 800(绿色)标记的山羊抗鼠IgG作为二抗，或者选用CF680或IRDye680(红色)标记的山羊抗兔IgG作为二抗染色，抗体的终浓度相同。染色后，细胞被干燥并用Odyssey®红外成像系统（Li-Cor）扫描。上面的两行细胞是用CF染料抗体复合物染色的，对应的下面两行细胞是用商品化购买的IRDye二抗（Li-Cor）染色的。
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图 10. 两倍稀释的HeLa 细胞裂解液先在聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳，然后转印至硝酸纤维素膜上，并用鼠抗alpha-tubulin和兔抗COX IV分别作为一抗，选用CF770或IRDye 800(绿色)标记的山羊抗鼠IgG作为二抗，或者选用CF680或IRDye680(红色)标记的山羊抗兔IgG作为二抗染色，抗体的终浓度相同。染色后，膜被干燥并用Odyssey®红外成像系统（Li-Cor Biosciences）扫描。对条带定量后发现，CF染料的荧光强度大约是相对应IRDye 二抗（Li-Cor）的3.5倍。
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图 11. 在尾静脉注射CF750标记的Avastin 24小时和96小时后，使用活体成像系统（Caliper LS）分别成像小鼠体内的肿瘤。图片来自于Caliper Life Sciences公司。

CF Dye	Ex/Em**	可完全替代以下产品：
CF680*	681/698	AF680,Cy5.5, DyLight680,IRDye680
CF750	755/777	AF750, Cy7
CF770*	770/797	DyLight800, IRDye800

* 兼容 LI-COR Odyssey 系统
** Ex/Em 波长基于抗体复合物
Table A. Near-IR CF Dye-labeled Secondary Antibody Conjugates

Cat#	Product Name	Unit Size	Unit Price	品 Pai
20292	Bovine serum albumin, CF680 conjugate	5x1mg	¥2234	美国Biotium
20060	CF680 Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20060-1	CF680 Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20241	CF680 Don key Anti-Guinea Pig IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20241-1	CF680 Don key Anti-Guinea Pig IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20278	CF680 don key anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20278-1	CF680 don key anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20062	CF680 Don key Anti-Sheep IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20062-1	CF680 Don key Anti-Sheep IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20287	CF680 goat anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20287-1	CF680 goat anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20065	CF680 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Human, Bovine, Horse, Rabbit, and Swine), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20063	CF680 Goat anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 fragment, 2 mg/mL	0.25 mL	¥1705	美国Biotium
20065-1	CF680 Goat anti-mouse IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20253	CF680 Goat anti-mouse IgG1, (?31), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20263	CF680 Goat anti-mouse IgG2a, (?32a), 2mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20273	CF680 Goat anti-mouse IgG2b, (?32b), 2mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20067	CF680 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Human, Mouse, and Rat), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20064	CF680 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), F(ab')2 fragment, 2 mg/mL	0.25 mL	¥1705	美国Biotium
20067-1	CF680 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20069	CF680 Goat Anti-Rat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20069-1	CF680 Goat Anti-Rat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20359	CF680 Monoclonal Mouse Anti-6X His IgG, 1mg/mL	50 uL	¥3587	美国Biotium
20219	CF680 monoclonal mouse anti-GFP IgG, 1 mg/mL	0.1 mL	¥2822	美国Biotium
20068	CF680 Rabbit Anti-Goat IgG (H+L), 2 mg/mL	0.5 mL	¥1940	美国Biotium
20068-1	CF680 Rabbit Anti-Goat IgG (H+L), 2 mg/mL	50 uL	¥823	美国Biotium
20243	CF680 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG (H+L), 2 mg/mL	0.5 mL	¥2058	美国Biotium
20243-1	CF680 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG (H+L), 2 mg/mL	50 uL	¥823	美国Biotium
20061	CF680 Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L), highly crossed-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20061-1	CF680 Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L), highly crossed-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20196	CF680R Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20196-1	CF680R Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20194	CF680R Don key Anti-Mouse IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20194-1	CF680R Don key Anti-Mouse IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20195	CF680R Don key Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20195-1	CF680R Don key Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20192	CF680R Goat anti-mouse IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20192-1	CF680R Goat anti-mouse IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20193	CF680R Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20193-1	CF680R Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20298	CF750 Don key Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20298-1	CF750 Don key Anti-Rabbit IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20070	CF750 Goat Anti-Mouse IgG (H+L), 2 mg/mL	0.5 mL	¥1940	美国Biotium
20070-1	CF750 Goat Anti-Mouse IgG (H+L), 2 mg/mL	50 uL	¥823	美国Biotium
20073	CF750 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), 2 mg/mL	0.5 mL	¥1940	美国Biotium
20073-1	CF750 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L), 2 mg/mL	50 uL	¥823	美国Biotium
20277	CF770 Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20277-1	CF770 Don key Anti-Goat IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20242	CF770 Don key Anti-Guinea Pig IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	0.25 mL	¥2176	美国Biotium
20242-1	CF770 Don key Anti-Guinea Pig IgG (H+L), highly cross-adsorbed, 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20279	CF770 don key anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20279-1	CF770 don key anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20288	CF770 goat anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	0.25 mL	¥2117	美国Biotium
20288-1	CF770 goat anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed, 2mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20077	CF770 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Human, Bovine, Horse, Rabbit, and Swine), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20077-1	CF770 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Human, Bovine, Horse, Rabbit, and Swine), 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20254	CF770 Goat anti-mouse IgG1, (?31), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20264	CF770 Goat anti-mouse IgG2a, (?32a), 2mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20274	CF770 Goat anti-mouse IgG2b, (?32b), 2mg/mL	0.25 mL	¥2470	美国Biotium
20078	CF770 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Human, Mouse, and Rat), 2 mg/mL	0.25 mL	¥2058	美国Biotium
20078-1	CF770 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Human, Mouse, and Rat), 2 mg/mL	50 uL	¥882	美国Biotium
20360	CF770 Monoclonal Mouse Anti-6X His IgG, 1mg/mL	50 uL	¥3587	美国Biotium
20220	CF770 monoclonal mouse anti-GFP IgG, 1 mg/mL	0.1 mL	¥2822	美国Biotium
20244	CF770 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG (H+L), 2 mg/mL	0.5 mL	¥2058	美国Biotium
20244-1	CF770 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG (H+L), 2 mg/mL	50 uL	¥823	美国Biotium

Table B. Other Near-IR CF dye-labeled Products

Cat#	Product Name	Unit Size	Unit Price	品 Pai
29007	Annexin V, CF680 conjugate, lyophilized	25 ug	¥2940	美国Biotium
29006	Annexin V, CF750 conjugate, lyophilized	25 ug	¥2940	美国Biotium
00048	Phalloidin, CF680R conjugate	300 U	¥3822	美国Biotium
29025	Wheat Germ Agglutinin, CF680R conjugate	5x1mg	¥3175	美国Biotium
29025-1	Wheat Germ Agglutinin, CF680R conjugate	1mg	¥823	美国Biotium

Table C. Reactive Near-IR CF Dyes and Labeling Kits

Cat#	Product Name	Unit Size	Unit Price	品 Pai
92029	CF680 maleimide	1 umole	¥2411	美国Biotium
92220	CF680 SE protein labeling kit	3 labelings	¥4292	美国Biotium
92139	CF680 succinimidyl ester	1 umole	¥2822	美国Biotium
92032	CF680R maleimide	1 umole	¥2705	美国Biotium
92226	CF680R SE protein labeling kit	3 labelings	¥4292	美国Biotium
92107	CF680R succinimidyl ester	1 umole	¥2940	美国Biotium
92221	CF750 SE protein labeling kit	3 labelings	¥4292	美国Biotium
92142	CF750 succinimidyl ester	1 umole	¥2822	美国Biotium
92222	CF770 SE protein labeling kit	3 labelings	¥4292	美国Biotium
92150	CF770 succinimidyl ester	1 umole	¥2822	美国Biotium
92155	CF790 succinimidyl ester	0.25 umole	¥1646	美国Biotium
92282	Mix-n-Stain CF680 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling	1 labeling	¥1117	美国Biotium
92283	Mix-n-Stain CF680R antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling	1 labeling	¥1117	美国Biotium
92241	Mix-n-Stain CF750 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling	1 labeling	¥1352	美国Biotium
92284	Mix-n-Stain CF750 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling	1 labeling	¥1117	美国Biotium
92265	Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling	1 labeling	¥1235	美国Biotium
92242	Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling	1 labeling	¥1352	美国Biotium
92285	Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling	1 labeling	¥1117	美国Biotium
92268	Mix-n-Stain CF790 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling	1 labeling	¥1235	美国Biotium
92248	Mix-n-Stain CF790 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling	1 labeling	¥1352	美国Biotium
92288	Mix-n-Stain CF790 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling	1 labeling	¥1117	美国Biotium
92160	VivoBrite rapid antibody labeling kit for small animal in vivo imaging, CF680 SE	3 labelings	¥4645	美国Biotium
92161	VivoBrite rapid antibody labeling kit for small animal in vivo imaging, CF750 SE	3 labelings	¥4645	美国Biotium
92162	VivoBrite rapid antibody labeling kit for small animal in vivo imaging, CF770 SE	3 labelings	¥4645	美国Biotium
92163	VivoBrite rapid antibody labeling kit for small animal in vivo imaging, CF790 SE	3 labelings	¥4822	美国Biotium

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