急性脊髓损伤(ASCI)大鼠模型

实验动物信息
动物模型名称	急性脊髓损伤(ASCI)大鼠模型
动物种属品系	Wistar大鼠
动物性别	雄性
动物年龄	180-200g
动物体重	实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
模型制备信息
模型分组	实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
模型方法
实验周期	4周
模型评价	1.术后一般情况观察：各损伤组大鼠的术后基本情况基本一致，打击后大鼠均表现为身体痉挛性颤动，尾巴痉挛性摆动，双下肢及躯体回缩样扑动。麻醉苏醒后大鼠双下肢呈弛缓性瘫痪，可出现尿潴留或尿失禁。解剖可见伤后大鼠硬脊膜内充血或水肿。 2.做BBB评分：0分：无可见后肢运动，1分：一或两个关节轻微运动，通常为髋和/或膝关节，都可认为造模成功； 3.斜板实验：将大鼠身体垂直于斜板的纵轴放置，斜板由自制的表面粗糙的木板制成，大鼠利用前肢和后肢的力量保持身体停留自斜板上。斜板每次升高或降低5度，以保证大鼠能停留在斜板上5秒，以能停留5秒的角度为其功能值。 4.BDA示踪术：术后5W，将大鼠麻醉后固定在脑立体定位仪上，纵行切开颅顶区头皮，剪开骨膜并推向四周，棉签擦拭颅骨，参考大鼠脑离体定位图谱，以前囟为原点，共选择 8 个位置钻孔，微量进样器将5% BDA 溶液1μL注射入大鼠脑运动皮质区，进针深度自颅骨表面起始约3.5mm，微量注射泵设置注射时间为5min，（留针5min）注射完毕后缝合头皮。2w后取损伤节段以下脊髓组织标本进行BDA 荧光染色，观察皮质脊髓束神经纤维。 5.大鼠坐骨神经荧光金逆行追踪：各组随机取大鼠，麻醉后沿股外侧肌间隙显露坐骨神经，通过组织钳钳夹挫伤坐骨神经，在避光条件下使用微量注射器在坐骨神经挫伤区多点注射2%荧光金，每侧坐骨神经注射0.4ul，注射速度为0.1ul/min。每注射位点留针5min，切口内撒8*104U的青霉素粉剂，逐层缝合切口，造模后正常饲养。1周后予脊髓损伤处取材进行组织学检查。进行冰冻切片，20um切片，每组每只动物5张切片，荧光显微镜下观察荧光金标记细胞的分布情况。