T4 DNA连接酶/T4 DNA连接酶

T4 DNA连接酶/T4 DNA连接酶T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应，也能催化双链RNA 5´ -磷酸末端和3´ -羟基末端间的连 接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上 反应均需消耗ATP。 随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer，16℃过夜连接可获得的连接效率；使用快连Buffer在室 温(25℃)下，仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接 反应。 使用建议：粘末端的连接反应：插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要，此比例在2-6之间Z好，低于2:1就会导致较低的连接效率，高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。 平滑末端的连接反应：平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时，可提高DNA浓度，将使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右。向粘粒或噬菌体进行连接反应：可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1，同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05～0.1μg／μl以上) 反应温度： 该酶的Z适温度为37℃，由于热稳定性较差，因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。 YZ剂：T4 DNA连接酶要求Mg2+，因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用 ，Z好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。 储存条件： -20℃ 用途： DNA片段和载体DNA的连接 更多产品咨询，请登录上海萌桠生物科技有限公司官网，www.shmengya.com.公司主营：生化试剂，植物标准品，透析袋，ELISA试剂盒，液体试剂等等，种类齐全，质量保证