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玻璃珠法柱式酵母DNAout

产品信息
  • 玻璃珠法柱式酵母DNAout产品及特点:
    本产品在xuanya柱式真菌DNAout基础上改良而得的大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。跟柱式真菌DNAout相比,它具有下列特点:
    1.处理量大,一次可以处理1-3g各种真菌组织。
    2.纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和YZ剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplexPCR、RAPD、RELP、AFLP、SouthernBlotting,microsatelliteanalysis等各种后续分子生物学实验。
    3.采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA(注:文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌DNA污染,用于提取真菌DNA往往会造成污染。这些文献可从本公司本产品介绍网页下方下载)。
    4.产率一般在10-100ug/g真菌样品。离心吸附柱吸附量为800ug。
    5.DNA片段长度一般在20-40kb左右。
    6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichiapastoris)等。

    玻璃珠法柱式酵母DNAout运输及保存:
    常温运输,4℃保存,有效期一年。
    自备试剂:无。

    玻璃珠法柱式酵母DNAout使用方法
    1.对菌液:取60-100mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
    2.对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1g),转移到装有20mL无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
    3.对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
    4.沉淀中加入10mL溶液A和10克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。
    5.加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。
    6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
    7.将20mL通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。
    8.重复上步操作一次。
    9.12000rpm空甩1分钟去除残留液体。
    10.将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500uLDNA洗脱液2.0。
    11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。
    12.所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。
    13.注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用转速离心10-15min代替12000rpm离心1-2min。

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    温馨提示:不可用于临床ZL。
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