大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书

大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书
大鼠乳腺上皮细胞提取物是从大鼠原代乳腺上皮细胞提取的，大鼠原代乳腺上皮细胞从正常大鼠乳腺组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书细胞种类：

大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
紧密连接蛋白25抗体 英文名称：CLDN25 0.1ml
背板胶质酰酯酶抗体 英文名称：NOTUM 0.2ml
有丝分裂着丝粒蛋白F抗体 英文名称：CENPF 0.2ml
钙粘附蛋白8抗体 英文名称：Cadherin 8 0.2ml
9号染色体开放阅读框66抗体 英文名称：C9orf66 0.2ml
红细胞生成素抗体 英文名称：EPO 0.1ml
胶原蛋白4a2亚基抗体 英文名称：CO4A2 0.2ml
2号染色体开放阅读框71抗体 英文名称：C2orf71 0.1ml
李斯特菌溶胞素抗体 英文名称：Listeriolysin 0.2ml
细胞色素c氧化酶7A2抗体 英文名称：COX7A2 0.1ml
干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原抗体 英文名称：c-Kit 0.1ml
大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书 15.6-1000 pg/mL 人白介素33(IL-33)ELISA试剂盒
 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Meteorin-like protein
 1.56-100 ng/mL 人HLAⅡ类组织相容性抗原DRβ5链(DRB5)ELISA试剂盒
 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proteasome subunit beta type-9
 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hemopexin
 0.156-10 ng/mL 人肿瘤坏死因子受体超家族成员12A(TNFRSF12A)ELISA试剂盒
 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Interferon alpha/beta receptor 2
 0.156-10 ng/mL 人淋巴细胞6/尿激酶型纤溶酶原激活因子受体结构域蛋白3(LYPD3)ELISA试剂盒
 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Pro-neuregulin-1, membrane-bound isoform
 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Neurogenic locus notch homolog protein 1
 78-5000 pg/mL 人膜铁转运辅助蛋白(HEPH)ELISA试剂盒
大鼠乳腺上皮细胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。