人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、等了解更多品Pai请咨询我们在线客服！
人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】细胞培养简介：
什么是细胞培养？细胞培养是从动物或植物中取出细胞，然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离，或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。
1）原代培养：
原代培养是指将细胞从组织中分离后，使其在合适的条件下增值直到占据所有可用基质（即：达到汇合状态）的培养阶段。在此阶段。必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基，从而对细胞进行传代培养，为其提供更多继续生长的空间。
2）细胞系：
首次传代培养后，原代培养物即被称为细胞系或者亚克隆。来自于原代培养的细胞系寿命有限（即：有限细胞系，见下文），随细胞的传代，生长能力的细胞会占据优势，导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
3）细胞株：
如果将细胞系的一个亚群通过克隆或者其他方法从培养物中明确地选择出来，则次细胞系就成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比，细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。
培养环境：
细胞培养的一大优势在于能够控制细胞生长的物理化学环境（即温度、pH值、渗透压、O2和CO2压力）和生理环境（即：激素和营养素浓度）。除温度外，培养环境均由生长培养基控制。
虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确，但是通过对血清成分更好地了解、确定细胞增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境（即：细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用），现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
 人食道平滑肌细胞提取于人食道组织。平滑肌的主要功能是负责空腔脏器的收缩，如血管、胃肠道、膀胱以及子宫等器官。它的结构与骨骼肌有很大的不同。人食管壁包括三层，外纵形和内环形，中间肌层是黏膜层。其中，平滑肌的收缩可能是通过两条不同的途径激活磷脂酶（增加细胞内Ca2+浓度和激活G蛋白）并激活PKC-epsilon依赖的信号通路。在体外培养研究表明人食管平滑肌细胞可以表达Na(+)通道。 虽然人食道组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的人食道组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的人食道组织片能使得人食道组织中食道平滑肌细胞的一些功能特性发生改变，从而将食道平滑肌细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的食道平滑肌细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的人原代食道平滑肌细胞中成纤维细胞的含量。 人食道平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养人的食道平滑肌细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM人食道平滑肌细胞组织解离液（3×1ml） （2）人食道平滑肌细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM人食道平滑肌细胞成纤维YZ剂（1ml（500X）） （4）人食道组织洗液(5 x 100 ml) （5）人食道平滑肌细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）人食道平滑肌细胞基础培养基(5 x 100ml) （7）人食道组织预备液 (1 x 100 ml) （8）人食道平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书
人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】一、所需仪器：
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】二、所需试剂：
胎牛血清（FBS）
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材：
离心管（15ml、50ml）
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管（2ml、5ml、10ml）

蛋白香叶烯基转移酶1α抗体 英文名称：PGGT1A 0.2ml
MAWD结合蛋白抗体 英文名称：PBLD 0.2ml
蛋白质磷酸酶2B抗体 PP2A β PP2A-β 英文名称：PP2A beta 0.1ml
磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 英文名称：Phospho-NFKB1 (Ser927) 0.1ml
核YZ蛋酸酶1抗体 英文名称：NIPP1 0.2ml
肌球蛋白重链7抗体 英文名称：MYH7B 0.2ml
/睾抗原2.4抗体 英文名称：BAGE4 0.2ml
神经前体细胞发育下调蛋白4抗体 英文名称：NEDD4 0.2ml
神经营养因子-3前蛋白抗体 英文名称：Neurotrophin 3 0.1ml
神经细胞特异性转录因子LDB1抗体 英文名称：LDB1 0.2ml
多腺苷二磷酸多聚酶抗体/多聚ADP-核糖聚合酶1 英文名称：PARP1 0.1ml
人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】 Oxytetracycline HCl 2058-46-0 盐酸土霉素 质量规格：>95%,BR
 Trapidil 15421-84-8 曲匹地尔（标准品） 质量规格：供鉴别用
 Substance P (7-11) 51165-05-0 物质P（7-11） 质量规格：>95%,BR
 (E/Z)-N,N-Didesmethyl-4-hydroxy Tamoxifen 1217237-98-3 (E/Z)-N,N-二去甲基-4-羟基它莫西芬 质量规格：美国进口
 IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water) 114389-69-4 乙酸二丙基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级] 质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂
 Methoxydienone 2322-77-2 沃氏物 质量规格：含量≥85%
 Potassium thiosulfate 10294-66-3 硫代硫酸钾(>98%,BR) 质量规格：>98%,BR
 Fmoc-Ala-OH 35661-39-3 Fmoc-L-丙氨酸 质量规格：>98%,BR
 rac-cis-Sertraline Hydrochloride 79617-95-1 外消旋顺式盐酸舍曲林 质量规格：美国进口
 D-α-Tocopheryl Succinate 893081 D-α-生育酚琥珀酸盐 质量规格：美国进口
 Methyl Nonanoate  1731-84-6 壬酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) 质量规格：>99.5%(GC),标准物质
 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 3584-23-4 2-(4-甲氧苯基)-4,6-双(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 质量规格：>98.0%(GC)

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】一、客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；
收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞，请在显微镜下观察细胞密度：
1. 未超过80%汇合度时，用75%酒精（建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水，喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作；然后打开盖子，先用枪头把培养基吸出10ml左右，放在离心管里，然后瓶口过火（严禁直接倾倒），这样可以保证不污染，再用10ml的移液管，将剩余的培液全部吸出，放于离心管中，培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整）之后，传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下：
1) 弃去培养液，用3ml PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来；
3) 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中，按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心5分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意：换液时一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。
人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】四、细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？
（1）细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、破损、漏液等，重发；
（2）冻存的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活，重发；
（3）存活的细胞静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；
（4）冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封，出现污染，重发；
（5）视具体情况而定。
五、细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（4）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（5）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（6）视具体情况而定。