人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】使用方法：
以T25培养瓶运输为例，客户收到细胞后，请按照一下方法进行操作。
1、取出T25培养瓶，75%的酒精进行表面消毒，拆下封口膜，放入二氧化碳培养箱恒温培养3-6小时，以稳定细胞状态。
2、细胞状态稳定后可以进行下游实验。
3、请尽快换成符合细胞生长的培养基。

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
人食道平滑肌细胞提取于人食道组织。平滑肌的主要功能是负责空腔脏器的收缩，如血管、胃肠道、膀胱以及子宫等器官。它的结构与骨骼肌有很大的不同。人食管壁包括三层，外纵形和内环形，中间肌层是黏膜层。其中，平滑肌的收缩可能是通过两条不同的途径激活磷脂酶（增加细胞内Ca2+浓度和激活G蛋白）并激活PKC-epsilon依赖的信号通路。在体外培养研究表明人食管平滑肌细胞可以表达Na(+)通道。 虽然人食道组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的人食道组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的人食道组织片

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

人食管平滑肌细胞培养试剂盒【Human Esophageal PrimacellTM：Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

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