NIE-115小鼠神经母细胞系 复苏团队专注复苏
NMC-G1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2传代
NUGC-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
DC2.4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
人普通转录因子ⅡB(GTFⅡB)ELISA试剂盒,英文名:Human GTFⅡB ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Agouti相关蛋白(AgRP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse AgRP ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H2126[H2126]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
3D4/21细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用Z广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。Z初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸/腺嘌呤缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
明胶培养基(营养明胶培养基),英文名:Gelatin Medium,用途:用于细菌的明胶生化试验
碱性琼脂,英文名:Alkaline Agar,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
人防御素α3(DEFα3)ELISA试剂盒,英文名:Human DEFα3 ELISA Kit,规格:48T/96T
A-673细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
hTERT-RPE1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HNE3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠微管蛋白α3c(TUBa3C)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TUBa3C ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞背景资料:详见相关文献介绍
人尿溶蛋白3A(UPK3A)ELISA试剂盒,英文名:Human UPK3A ELISA Kit,规格:48T/96T
标准Ⅰ号营养肉汤,英文名:StandaredⅠNutrient Broth,用途:用于细菌培养,营养丰富
Bennett琼脂,英文名:Bennett Agar,用途:用于需氧放线菌孢子的产生
黄豆粉液体培养基,英文名:Bean Broth Medium,用途:用于放线杆菌的培养
大鼠肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)ELISA试剂盒,英文名:CPT1A ELISA Kit,规格:48T/96T
Mv-4-11细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE140细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
甘油天门冬素琼脂基础,英文名:ISP Medium 5( Glycerol Asparagine Agar Base),用途:用于链霉菌属的培养鉴定,每100ml添加1支甘油
哥伦比亚CNA琼脂/哥伦比亚CNA血琼脂基础,英文名:Columbia CNA Agar,用途:用于G+球菌的选择性分离,添加羊血制备哥伦比亚CNA血琼脂
TGC流体培养基,英文名:TGC Medium ,Fluid,用途:——用于无菌检验
营养盐琼脂培养基,英文名:Nutrient Salt Agar Medium,用途:用于KJ性能试验,每升培养基中添加0.5g吐温-80
小鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CASP11 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人肺炎支原体抗体(IgM)ELISA试剂盒,英文名:Human IgM ELISA Kit,规格:48T/96T
OSC-19细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NB4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
H22细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HX147细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
化钠结晶紫增菌液,英文名:Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth,用途:用于副溶血性弧菌的选择性增菌
MUG营养琼脂培养基(NA-MUG),英文名:NA-MUG Agar,用途:用于大肠埃希氏菌滤膜法计数
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
玉米粉琼脂,英文名:Corn Meal Agar,用途:用于真菌培养
支原体半流体培养基,英文名:Mycoplasma Medium,Fluid,用途:用于支原体的培养
化钠三糖铁琼脂,英文名:NaCl TSI Agar,用途:含1.5%NaCl,用于弧菌生化试验
B12测试培养基,英文名:B12 Assay Medium,用途:用于维生素B12检测
本尼特琼脂,英文名:Benett’s agar,用途:用于链霉菌属的培养鉴定
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
小鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse DLG4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人合成酶1(SEPHS1)ELISA试剂盒,英文名:Human SEPHS1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人脱氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)ELISA试剂盒,英文名:Human DNASEⅩ ELISA Kit,规格:48T/96T
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
SBG肉汤,英文名:Selenite Brilliant Green Broth,用途:用于沙门氏菌选择性增菌
细胞形态特性:详见细胞说明书
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
YPD肉汤,英文名:YPD Broth,用途:用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
NCI-H747细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2次
SU-DHL-4细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A-427细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JM1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:换液2-3次一周
SKOV-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。