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PK136小鼠B淋巴瘤X小鼠瘤细胞系 复苏团队专注复苏

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  • PK136小鼠B淋巴瘤X小鼠瘤细胞系 复苏团队专注复苏
    c918细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    U87 MG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    KG-1a细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠G蛋白偶联受体120(GPR120)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GPR120 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PF4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    HFL-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HLEC(晶状体)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MOLM-13细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    【悬浮型细胞的传代操作】1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm 5分钟;2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。【注意事项】1)严格的无菌操作;2)适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。附:EDTA(0.02%四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g,KCl 0.20g,KH2PO4 0.02g,葡萄糖 2.00g,0.5%红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
    细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
    梭状芽孢杆菌计数琼脂,英文名:Clostridia Count Agar,用途:用于梭状芽孢杆菌计数
    石蕊牛乳培养基,英文名:Litmus Milk Medium,用途:用于测定细菌对牛乳的发酵
    萨氏液体培养基(SDY培养基),英文名:Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract,用途:——用于真菌的培养
    人脂解激活脂蛋白受体(LSR)ELISA试剂盒,英文名:Human LSR ELISA Kit,规格:48T/96T
    OS-732细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    ARIP细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CP70细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒,英文名:Mouse FETU-A ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    小鼠尾型同源盒转录因子2(CDX2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CDX2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂,英文名:VRBA-MUG,用途:用于大肠杆菌平板计数
    BIGGY琼脂,英文名:Bismuth Sulfite Glucose Glycine Yeast Agar,用途:用于念珠菌的分离和计数
    豆芽汁葡萄糖琼脂培养基,英文名:Soybean sprout Extract Glucose Agar Medium,用途:用于真菌尤其是霉菌的培养
    大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒,英文名:ISR-β ELISA Kit,规格:48T/96T
    HHL-5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    L2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
    1/2MS培养基,英文名:1/2 Murashige & Skoog Medium,用途:大量元素减半,微量元素和维生素不变,不含琼脂和蔗糖
    黄豆粉液体培养基,英文名:Bean Broth Medium,用途:用于放线杆菌的培养
    DG-18琼脂基础,英文名:Dichloran Glycerol Agar Base,用途:用于霉菌酵母菌和嗜渗酵母菌的计数,每升添加220g甘油
    BTB培养基,英文名:BTB Medium,用途:用于弧菌的选择性增菌
    人白细胞衍生趋化因子1(LECT1)ELISA试剂盒,英文名:Human LECT1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    人肝X受体(LXR)ELISA试剂盒,英文名:Human LXR ELISA Kit,规格:48T/96T
    LICCF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Toledo细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:每2-3天换液
    RPMI 8226细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    184A1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    霉菌琼脂培养基,英文名:Mould Agar Medium,用途:含琼脂,用于霉菌分离培养
    改良桑塔基氏培养基基础,英文名:Starkey,s Medium Base, Modified,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液,英文名:Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0,用途:用于样品制备
    营养琼脂(NA),英文名:Nutrient Agar,用途:用于细菌的纯化和培养
    Luria琼脂基础,英文名:Luria Agar Base,用途:含0.05%NaCl,用于大肠杆菌的培养和保存,视需要每1L培养基中无菌添加10ml20%葡萄糖溶液
    脑心浸出液琼脂(BHIA),英文名:Brain Heart Infusion Agar,用途:用于细菌尤其是苛养菌的培养
    连四盐肉汤培养基基础,英文名:Fluid Tetrathionate Medium Base,用途:用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    人多巴胺受体D1(D1R/DRD1)ELISA试剂盒,英文名:Human D1R/DRD1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人维生素A(VA)ELISA试剂盒,英文名:Human VA ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒,英文名:CYT Ab ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次Z好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
    幽门螺杆菌琼脂培养基基础,英文名:Helicobacter pylori Agar Medium Base,用途:用于幽门螺杆菌的分离培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    N6培养基(不含琼脂),英文名:N6 Medium without Agar,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
    MMO-MUG培养基,英文名:Minimal Medium ONPG-MUG,用途:用于总大肠菌群酶底物法检测
    HCGC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CAL62细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SK-BR-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
    SW527细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RTE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
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