HN13人口腔鳞状细胞癌细胞系 消化操作要注意什么
人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒，英文名：Human CHAc ELISA Kit，规格：48T/96T
人腺苷酸激酶7(AK7)ELISA试剂盒，英文名：Human AK7 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Hornerin蛋白(HRNR)ELISA试剂盒，英文名：Human HRNR ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒，英文名：PAP ELISA Kit，规格：48T/96T
3%化钠碱性蛋白胨水，英文名：3%Nacl Alkaline Peptone Water，用途：用于副溶血性弧菌选择性增菌
细胞背景资料：舌鳞癌；女性
Cary-Blair氏运送培养基，英文名：Cary-Blair Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
动力培养基，英文名：Power Medium，用途：用于细菌动力试验
大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒，英文名：IL-2sRβ ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠血管生成素2(Ang 2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Ang 2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次，蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向15磅时，维持20-30分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TSN琼脂，英文名：Trypticase Sulfite Neomycin Agar，用途：用于产气荚膜梭菌的选择性分离和计数
梭杆菌选择性琼脂基础，英文名：Fusobacterium Selective Agar (FSA) Base，用途：用于梭杆菌的选择性分离和培养,需添加羊血及抗生素
普通啤酒琼脂(UBA培养基)，英文名：Universal Beer Agar，用途：用于啤酒腐败菌、厌氧菌的检测
SN12-PM6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OKT3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hep3B2.1-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
酵母氮源基础、无基酸，英文名：Yeast Nitrogen Base，without Amino Acid，用途：用于通过碳源和基酸的利用对酵母菌进行分类
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
毛藓菌琼脂1号，英文名：Trichophyton Agar #1，用途：用于毛藓菌属的鉴定
Cary-Blair氏运送培养基，英文名：Cary-Blair Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
人白细胞衍生趋化因子2(LECT2)ELISA试剂盒，英文名：Human LECT2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒，英文名：Human FⅧ-Ag ELISA Kit，规格：48T/96T
RLE-6TN细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H446细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁/悬浮生长，混合；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
SU-DHL-4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
c918细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
蔗糖胰蛋白胨肉汤，英文名：Sucrose Tryptone Broth，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的斑点酶联免疫试验
细胞形态特性：详见细胞说明书
改良月桂基盐胰蛋白胨(mLST)肉汤基础，英文名：Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth Base，用途：用于阪崎肠杆菌增菌,每100ml中加入万古霉素1mg
MTEC1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BIU-87细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
tpc-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
C166细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HBMEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次后(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NAC琼脂培养基，英文名：Nalidixic Acid Cetrimide Agar，用途：用于微生态活菌制品中铜绿假单胞菌的分离培养
麦芽汁琼脂培养基，英文名：Malt Agar Medium，用途：含3%麦芽浸粉,不含霉素,用于霉菌和酵母菌的分离和培养
布氏琼脂，英文名：Brucella Agar，用途：用于布鲁氏菌属的培养
人碱性神经酰胺酶3(ACER3)ELISA试剂盒，英文名：Human ACER3 ELISA Kit，规格：48T/96T
Duckembryo细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维母细胞样；细胞传代方法：1：2传代
细胞生长特性：贴壁
NCI-H1299细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次。
Beta-TC-6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：4传代，每2-3天换液一次
HCEC-12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PC-12[PC12]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 840.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代，每周换液2—3次
HS578T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠G蛋白偶联雌激素受体1(GPER)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GPER ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒，英文名：MC Ab ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO2培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于4°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于4°C冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
Slantz and Bartley 培养基，英文名：Slantz and Bartley medium，用途：用于肠球菌、粪链球菌的分离和培养
MHCC97H细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
麸皮液体培养基，英文名：Wheat Bran Medium，用途：用于细菌、真菌的培养
改良牛津培养基(MOX)基础，英文名：Modified Oxford Medium Base，用途：用于李氏菌分离培养,每200ml添加1支多粘菌素E和2支拉氧头孢溶液
盐还原菌培养基E，英文名：Postgate’s Medium E for Sulfate Reducers，用途：含琼脂,用于脱微生物的培养和计数,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
桔汁琼脂(OSA)，英文名：Orange Serum Agar，用途：用于耐酸细菌的分离培养
匹克氏肉汤基础，英文名：Pick’s Broth Base，用途：用于溶血性链球菌增菌,每50ml添加羊血2.5ml
