PE/CA-PJ34(Clone 12)人口腔鳞状细胞癌细胞系 消化过后还贴壁怎么办
马铃薯琼脂,英文名:Potato Agar,用途:不含葡萄糖,用于霉菌的分离培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
MH肉汤Ⅱ(阳离子调节)/CAMHB,英文名:Mueller Hinton Ⅱ Broth(Cation-Adjusted)/CAMHB,用途:即CAMHB,用于细菌的敏感性试验
小鼠肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse FABP2 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
小鼠TATA框结合蛋白相关因子4(TAF4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TAF4 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠基质裂解蛋白(MAT)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MAT ELISA Kit,规格:48T/96T
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
Nb2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
PHM82细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AAV-293细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1993细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
EC肉汤,英文名:EC Broth,用途:用于大肠杆菌和粪大肠菌群的测定
碎肉碳水化合物肉汤基础,英文名:Chopped Meat Carbohydrate Broth(CMC),用途:用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养,含VK ,需添加庖肉牛肉粒
RAMSCs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
UT-7细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长,有1%~2%的细胞可轻微贴壁。;细胞形态特性:圆形;细胞传代方法:维持细胞浓度在1.0-1.5×106cells/ml,1:2传代,2-3天1次。
3T3L1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U-118MG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
精酸双水解酶试验培养基/精酸脱羧酶肉汤,英文名:Double-arginine Hydrolase Test Medium,用途:用于细菌的精酸双水解酶试验
李氏增菌肉汤(LB1,LB2)基础,英文名:Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李斯特氏菌增菌,每225ml添加啶酮酸溶液1支组成LB1,每200ml添加啶酮酸溶液1支组成LB2 ,备用。
OGY琼脂基础,英文名:Oxytetracycline Glucose Yeast Agar,用途:用于霉菌、酵母菌计数,葡萄糖10g/L,每100ml添加1支土霉素溶液
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
AN3CA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
麦康凯琼脂基础,英文名:MacConkey Agar Base,用途:不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
AHM鉴别培养基,英文名:Aeromonas hydrophila Medium,用途:用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别
HCS-2/8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Tca-83细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-BR-3[SKBR3]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
YPGA培养基,英文名:Yeast extract Peptone Glucose Medium,用途:用于甘蔗流胶病菌检验
UM琼脂培养基,英文名:Uchimiya and Miurashige Medium,用途:用于诱导愈伤组织形成
Dey/Engley中和琼脂基础,英文名:Dey/Engley Neutralizing Agar Base,用途:用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
大鼠自噬基因Beclin 1(BECN1)ELISA试剂盒,英文名:BECN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HMG-17 ELISA Kit,规格:48T/96T
人皮质酮(CORT)ELISA试剂盒,英文名:Human CORT ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
DC2.4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
HCEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
桔汁琼脂(OSA),英文名:Orange Serum Agar,用途:用于耐酸细菌的分离培养
克氏双糖铁琼脂(KI),英文名:Kligler Iron Agar,用途:用于细菌的复合生化试验
TGE琼脂,英文名:Tryptone Glucose Extract Agar,用途:用于菌落总数测定
小鼠P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA试剂盒,英文名:Mouse P38MAPK ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
大鼠分泌性白细胞肽酶YZ剂(SLPI)ELISA试剂盒,英文名:SLPI ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞形态特性:上皮样
人蛋白酪酸激酶2β(PTK2β)ELISA试剂盒,英文名:Human PTK2β ELISA Kit,规格:48T/96T
MOLT-16细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MPP 89细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L1210细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
no.11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
阿须贝氏无氮培养基,英文名:Ashby’s Nitrogen-Free Agar,用途:用于固氮菌的培养
细胞生长特性:贴壁生长
抗生素培养基A(PH8.0),英文名:Medium A(PH8.0),用途:用于抗生素检测
麦康凯(MAC)肉汤(CT-MAC肉汤基础),英文名:MacConkey Broth(CT-MAC Broth Base),用途:含结晶紫、中性红,用于O157菌选择性增菌,每100ml添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择Z合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Z快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤Z好使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个Z重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
曲霉素琼脂(AFPA)基础,英文名:AFPA Agar Base,用途:用于曲霉菌和寄生曲霉的分离培养,每100ml添加1支霉素溶液
SW 626细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H378细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。