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KG-1急性髓系细胞白血病细胞系 保种冷冻复苏ZX

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  • KG-1急性髓系细胞白血病细胞系 保种冷冻复苏ZX
    人糖合酶1(CHSY1)ELISA试剂盒,英文名:Human CHSY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠可溶性E选择素(sE-selectin))ELISA试剂盒,英文名:sE-selectin) ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠性别决定区Y框蛋白3(SOX3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SOX3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    沙氏葡萄糖琼脂培养基,英文名:Sabouraud’s Glucose Agar Medium,用途:用于真菌培养(ZG药典2010)
    m-HPC琼脂,英文名:Heterotrophic Plate Count Agar,用途:用于菌落总数测定,每100ml培养基添加1ml甘油 (甘油)
    细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
    细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
    IM-9细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
    HCC-1833细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NCI-BL1339细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;细胞传代方法:3-4天换液1次。
    UMR-106细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    U937[U-937/U937-DC-SIGN]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CRT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞生长特性:悬浮生长
    细胞形态特性:原粒细胞
    化钠胰蛋白胨稀释液,英文名:Sodium Chloride Tryptone Diluent,用途:用于样品的制备与稀释
    APM培养基,英文名:Aeromonas Pyrazinamidase activity Medium,用途:用于吡嗪酰胺酶活性实验,溶解于0.2M Tris-马来酸溶液
    化钠三糖铁琼脂,英文名:NaCl TSI Agar,用途:含1.5%NaCl,用于弧菌生化试验
    V-P半固体琼脂(VP),英文名:Voges-Proskauer Semisolid Agar,用途:用于细菌V-P试验
    酵母氮源琼脂,英文名:Yeast Nitrogen Agar,用途:用于通过碳源的利用对酵母菌进行分类
    pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液,英文名:Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0,用途:用于样品制备
    贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得Z多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    西蒙氏柠檬酸盐肉汤/枸橼酸盐肉汤,英文名:Simmons Citrate Broth,用途:用于柠檬酸盐利用实验
    阿须贝氏无氮培养基,英文名:Ashby’s Nitrogen-Free Agar,用途:用于固氮菌的培养
    酵母基础,无维生素,英文名:Vitamin Free Yeast Base,用途:用于通过维生素的利用对酵母菌进行分类
    解脲支原体肉汤基础,英文名:Ureaplasma urealyticum Broth Base,用途:用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
    联合固氮菌培养基,英文名:Endophytic Diazotrophs Medium,用途:用于固氮螺菌的培养
    小鼠肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TWEAK ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠半乳凝集素8(GAL8)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GAL8 ELISA Kit,规格:48T/96T
    CH培养基(含抗生素),英文名:Cysteine Heart Blood Agar with antibiotics,用途:用于弯曲菌培养,每100ml添加2支多粘菌素B溶液、1支新生霉素储备液和10ml无菌脱纤维绵羊全血
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    1M盐缓冲液(pH6.0),英文名:Phosphate solution(1M,pH6.0),用途:用于毕氏酵母表达培养基的制备
    COLO394[COLO394]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    BCPAP/B-CPAP细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    WM451细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒,英文名:INS ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠高分子量激肽原(HMWK)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HMWK ELISA Kit,规格:48T/96T
    OV90细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    CCRFS-180细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    H1299细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人分拣连接蛋白12(SNX12)ELISA试剂盒,英文名:Human SNX12 ELISA Kit,规格:48T/96T
    RPPVEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    TMD8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HLF-02细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    JurkatD,E细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
    NRK-49F细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HSC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    ECA109细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    卵黄琼脂培养基基础,英文名:Egg Yolk Agar Base,用途:用于梭菌的分离培养,每100ml添加2支50%卵黄盐水悬液
    CHP-212细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成神经细胞;细胞传代方法:1:10 1:50每2 - 3周;每周换液2-3次。
    亚利桑那菌琼脂(SA),英文名:Salmonella Arizona Agar,用途:用于亚利桑那菌的分离
    TTC-沙保弱培养基,英文名:Sabouraud’s Medium with TTC,用途:用于真菌的培养和计数
    改良桑塔基氏培养基基础(含2.5%NaCl),英文名:Starkey,s Medium Base, Modified with 2.5% NaCl,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
    DCR培养基,英文名:DCR Medium,用途:含蔗糖和琼脂,用于松、杉等植物的组织培养
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