Acetylcholine receptor(Nicotinic,a7)

中文名称：Acetylcholine receptor(Nicotinic,a7)抗体
[产品简介]下面是我公司为研究者们总结出的Acetylcholine receptor(Nicotinic,a7)抗体实验遇到的常见问题
FISH常见问题消化不足表现：细胞成块，没有清楚的边界；信号弱，可见细胞间连接物。解决：检查酶溶液的温度并增加消化时间；检查预处理液的温度并增加预处理的时间。
过消化
表现：没有清楚的细胞边界，细胞形态被破坏；可能有弱的或缺失的信号；荧光背景高。解决：检查酶溶液的温度并减少消化时间；检查预处理液的温度并减少预处理的时间。过预处理表现：没有清楚的细胞边界，具不规则的细胞形态；可能有弱的或缺失的信号。解决：检查酶溶液的温度并减少消化时间；检查预处理液的温度并减少预处理的时间。杂交时间不当表现：形态正常、信号弱；解决：增加杂交时间；检查探针量；检查杂交后洗脱条件。背景高原因：杂交后洗脱不充分。解决：检查洗脱液的温度。信号强度变化原因：由于气泡造成的探针不均匀分布。解决：重复实验并确认杂交期间盖玻片下无气泡；在探针混合物的接触面加盖盖玻片。组织掉片或组织形态分解原因：组织固定不足；使用不恰当的玻片；不正确的烤片；移除盖玻片时组织被撕掉；过消化；过预处理。解决：校验固定条件；使用正确的玻片；校验烤片条件；泡更长的时间使盖玻片脱落。过变性表现：线状信号。解决：检查变性的时间和温度。
无/弱信号

可能的原因	推荐的解决方案
未添加探针（别笑，特别是探针和杂交缓冲液分开的非预混情况）	探针充分解冻，确保移液器吸取到探针试剂。
探针、杂交缓冲液使用前没有充分混匀（非预混探针）	吹打探针混合液，使探针充分混匀，短暂离心。
探针添加数量不足	确保移液器吸取准确，探针加入量足量，请不要稀释探针（包括预混和非预混）。 使用前确保探针解冻充分并达到室温。
标本及探针变性不充分	确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。
标本及探针变性不充分	确保玻片进行变性时温度在推荐的温度。 将玻片变性时间延长2~4分钟。
杂交条件不合适	确保遵守杂交所规定的时间和温度。 橡皮胶封片时勿留缝隙。 根据情况，调整杂交时间（跨度一般较大）和湿度。
杂交时盖玻片下有气泡形成	放盖玻片时要覆盖探针表面，轻轻挤压以便挤出气泡。
玻片干燥不充分	探针滴加至玻片前，确保玻片上的乙醇溶液已经完全挥发。
探针干燥太快	探针滴加后应立即将盖玻片覆盖目标区域。 进行洗脱时，一次只能移除一张玻片上的盖玻片，并且在移除下一张之前立即将玻片浸入洗脱液中。
洗脱液或洗脱条件不正确	确保按照产品说明书要求配制洗脱液（生产商提供洗脱液的除外）。 确保洗脱液的温度达到洗脱步骤所规定温度。 玻片浸入洗脱液前移去盖玻片。
探针或标本玻片储存不正确	确保探针-20℃避光保存。 将未杂交玻片干燥后置于-20℃长期保存或者室温短期保存（一般不超过两星期）。 将杂交后玻片置于-20℃避光保存。

沟通=成功
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