qEV高纯度外泌体分离柱

qEV是一种根据尺寸排阻原理SEC（Size exclusion Chromatography）设计的细胞外囊泡（外泌体）分离-纯化技术，由新西兰Izon公司研发和生产。qEV可以从细胞培养上清液或复杂生物体液中快速、简便、无损地提取细胞外囊泡（外泌体），无需复杂的前处理和试剂准备。

qEV技术有效避免了超速离心和密度梯度离心等传统方法分离囊泡（外泌体）时，由于超高离心力与蔗糖溶液高粘性造成的HDL蛋白或囊泡的聚集污染，也避免了传统方法对于囊泡（外泌体）的膜结构的损伤，使其保留完整的生物活性。
 

qEV产品优势

1. 快速提取（仅需约 15 分钟）；
2. 污染背景蛋白去除率>99%；
3. 高密度脂蛋白（HDL）去除率>95% ；
4. 保持细胞外囊泡的完整性和生物功能；
5. 可分离指定粒径大小的外泌体；
6. 按照ISO13485质量标准制造；
7. 尤其适用于外泌体功能研究中，用于细胞培养或动物注射的高纯度外泌体的获得；
8.  适用于多种类型样品的外泌体提取，包括：血清、血浆、尿液、细胞上清、脑脊液、唾液、房水、宫腔灌洗液、腹水、胸水、胆汁、蜂王浆、牛奶等。

qEV工作原理

        
qEV是采用尺寸排阻SEC原理按照分子粒径进行分段分离的方法。基本原理如图1所示，将生物样品流经具有固定孔隙的SEC填充物，吸附粒径较小的分子如蛋白、脂类等，而较大粒径的分子或颗粒不能进入孔隙。在缓冲液的作用下，较大粒径的囊泡（外泌体）流速快，在特定的阶段会被洗脱出来进入样品收集管，成为实验样品。而小分子具有较长的保留时间，被洗脱出来。
 

图1 尺寸排阻SEC原理图

qEV使用步骤（以qEVoriginal产品为例）

使用qEV尺寸排阻分离柱分离囊泡（外泌体）只需15分钟。

1、用PBS冲洗柱。

2、用移液管将500μl样品移到柱上。

3、向分离柱中添加PBS以洗脱囊泡（外泌体）。

4、按500μl组分收集囊泡（外泌体）。

图2 qEV收集结果展示
 

用qNano系统对qEV收集的囊泡（外泌体）进行定量测量。图2显示了从血清样品中收集的组分的分析。在280纳米处用吸光度法测定蛋白质的相对浓度。数据表明，收集的第7至9组分具有Z高浓度的囊泡（外泌体），而污染的血清蛋白洗脱的分数为第11至30组分（左图）。通过比较分离前和分离后的囊泡（外泌体）与蛋白质浓度比，第7组分的囊泡富集量为蛋白质的6000倍（右图）。根据样品的不同，如果下游分析分别需要更高的囊泡（外泌体）纯度或更高的囊泡（外泌体）产量，可将第7至9部分或第7至11部分汇集在一起。
 

 qEV产品规格

相关文献

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